土壤有效硅试剂盒说明书
微量法100T/96S
注 意 ：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
硅元素是一种十分重要的植物营养元素，土壤中有效硅含量影响着植物的光合作用、呼吸作用以及对逆境的抗性。
测定原理：
硅酸根与钼酸铵在弱酸条件下生成硅钼酸，可被还原剂还原成硅钼蓝，在700nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：
天平、常温离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、震荡仪。
试剂组成和配制：
提取液：液体105mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体4mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体4mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体4mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加入4mL试剂四溶剂充分溶解。
试剂四溶剂：液体4mL×1瓶，4℃保存。
样本处理：
新鲜土样风干，过20目筛，按照土壤质量（g）：提取液体积(mL)为1：5的比例（建议称取约0.2g土样，加入1mL提取液），振荡提取1h，10000g ，25℃离心10min，取上清液待测。
测定操作表：
空白管 | 测定管 | |
样本（μL） | 40 | |
提取液（μL） | 40 | |
试剂一（μL） | 40 | 40 |
混匀，35℃，15min | ||
试剂二（μL） | 40 | 40 |
混匀，25℃，10min | ||
试剂三（μL） | 40 | 40 |
试剂四（μL） | 40 | 40 |
充分混匀，25℃静置30min | ||
于微量石英比色皿/96孔板，蒸馏水调零，测定700nm处吸光值A，分别记为A空白管和A测定管，△A=A测定管-A空白管 | ||
计算公式：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.0933x -0.0523，R2 = 0.9992
有效硅含量（mg/kg）=（△A+0.0523）÷ 0.0933×V反总÷（W×V样÷V样总）
= 53.6×（△A+0.0523）÷W
V反总：反应总体积，0.2mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.04mL；V样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g
b. 用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.0467x -0.0523，R2 = 0.9992
有效硅含量（mg/kg）=（△A+0.0523）÷ 0.0467×V反总÷（W×V样÷V样总）
= 107.2×（△A+0.0523）÷W
V反总：反应总体积，0.2mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.04mL；V样总：加入提取液体积，1mL，W：样本质量，g
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