土壤纤维素酶（Solid-cellulase，S-CL）活性测定试剂盒说明书
微量法100管/48样
注 意 ：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
S-CL主要来源于土壤微生物，S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。
测定原理：
采用蒽酮比色法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品：
酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、甲苯、硫酸（不允许快递）和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
试剂一：甲苯10mL×1瓶，4℃保存；（自备）
试剂二：液体6mL×1瓶，4℃保存；
试剂三：液体40mL×1瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存； 临用前加入5mL蒸馏水和45mL浓硫酸充分溶解待用。
样品处理：
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过30~50目筛。
加样表和测定步骤：
对照管 | 测定管 | |
风干土样（g） | 0.05 | 0.05 |
试剂一 (μL) | 50 | 50 |
振荡混匀15min | ||
试剂二（μL ） | 90 | |
试剂三（μL ） | 370 | 370 |
蒸馏水（μL ） | 180 | 90 |
37℃振荡反应3h后，90℃水浴15min（盖紧，防止水分散失），冷却后
8000g 25℃离心10min，取上清，得糖化液
糖化液 (μL) | 140 | 140 |
试剂四 (μL) | 260 | 260 |
混匀， 90℃水浴10min（盖紧，防止水分散失），冷却，取200μL至微量石英比色皿或96孔板中，测620nm下吸光值A，计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。
S-CL活力计算：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 5.018x - 0.0462；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。
单位的定义：每天每g土样中产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-CL活力（mg/d/g）＝(ΔA+0.0462) ÷5.018×V反总÷W÷T =19.1×(ΔA+0.0462)
T：反应时间，3h=1/8d； V反总：反应体系总体积：0.6mL；W：样本质量，0.05g。
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 2.5090x - 0.0462；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。
单位的定义：每天每g土样中产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-CL活力（mg/d/g）＝(ΔA+0.0462) ÷2.5090×V反总÷W÷T =38.3×(ΔA+0.0462)
T：反应时间，3h=1/8d； V反总：反应体系总体积：0.6mL；W：样本质量，0.05g。
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