土壤全钛试剂盒说明书
微量法100T/96S
注 意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
钛是自然界广泛存在的过渡金属元素，与铁元素紧密共生，二者存在一定的相关性，土壤中钛对植物有及其重要的生理作用，充足的钛可保证植物结实率提高，空瘪率减少，并增强植物的抗害效果。
测定原理：
在酸性条件下，二安替比林甲烷与钛离子生成黄色络合物，在390nm处有特征吸收峰，颜色深浅在一定范围内与钛离子浓度成正比。
自备实验用品及仪器：
天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板，HCl。
试剂组成和配制：
提取液：自备。HCl：H2O =1:1。
试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加4mL水充分溶解。
试剂三：液体8mL×1瓶，4℃保存。
样本处理：
按照土壤质量（g）：试剂一质量(g)为1：5的比例（建议称取约0.1g土样，加入0.5g试剂一）称取土样于坩埚中，在900℃熔融20min，趁热加10mL提取液溶解熔块，待wan全溶解后于10000g ，25℃离心10min，取上清液待测。
测定操作表：
空白管 | 测定管 | |
样本（μL） | 40 | |
试剂二（μL） | 40 | 40 |
提取液（μL） | 80 | 40 |
试剂三（μL） | 80 | 80 |
充分混匀，25℃静置30min，于微量石英比色皿/96孔板，测定390nm处吸光值A，分别记为A空白管和A测定管，△A=A测定管-A空白管 | ||
计算公式：
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.1064x +0.0078，R2 = 0.9971
全钛含量（mg/kg）=（△A-0.0078）÷ 0.1064×V反总÷（W×V样÷V样总）
= 469.92×（△A-0.0078）÷W
V反总：反应总体积，0.2mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.04mL；V样总：加入提取液体积，10mL，W：样本质量，g
b. 用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.0532x +0.0078，R2 = 0.9971
全钛含量（mg/kg）=（△A-0.0078）÷ 0.0532×V反总÷（W×V样÷V样总）
= 939.84×（△A-0.0078）÷W
V反总：反应总体积，0.2mL；V样：反应体系中加入样本体积，0.04mL；V样总：加入提取液体积，10mL，W：样本质量，g
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