做PCR實驗時常見的污染源都來自哪里

時間：2022/4/14閱讀：4648

　　PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。是一種分子生物學技術，用于放大特定的DNA片段，可看作生物體外的特殊DNA復制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng)，能迅速掌握患者體內的病毒含量，其精確度高達納米級別。

　　PCR實驗室的污染來源有哪些？

　　1.樣本間交叉感染：

　　收集樣本的容器被污染或樣本密封不嚴導致外溢；不同樣本移液時忘記更換槍尖或未使用帶濾芯槍尖；移液器等實驗器具及耗材未及時消毒滅菌；不同樣本同時開蓋或樣本劇烈震蕩、反復吹吸導致氣溶膠形成擴散，相互交叉污染。

　　2.實驗試劑污染：

　　主要是在 PCR 組分試劑加樣過程中，由于移液器、容器、陰性對照及其它試劑被核酸模板或陽性對照污染。加樣過程中，因為PCR試劑對溫度十分敏感，需要通過冰浴使得PCR試劑和PCR板/管處于0℃，但這個過程也充滿污染風險。

　　3.擴增產(chǎn)物污染：

　　大量拷貝的產(chǎn)物泄漏或擴增后的PCR反應管意外開蓋，這是PCR反應中最主要、最常見的污染問題。因為PCR產(chǎn)物拷貝量大，遠遠高于PCR檢測數(shù)個拷貝的極限，所以極微量的PCR產(chǎn)物污染，就可形成假陽性。

　　4.克隆質粒污染：

　　作為陽性質控品的克隆質粒外溢。

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