在实验室中,用得最多的接种工具是接种环、接种针。有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面要将菌液均匀涂布时,需要用到涂布棒。那么微生物检验常见接种方法有哪些呢?
(1)划线接种法
平板划线分离法--分区划线分离法
?、儆媒又只废冉嘌锿坎加谄桨?区并作数次划线,再在2、3……区依次划线;
?、诿炕暌桓銮?,转动培养皿约70度角,并将接种环灭菌一次,待冷后再划下一区域;
?、勖恳磺虻幕呔哟ド弦磺虻慕又窒?~2次,使接种量逐渐减少,以获得单个菌落;
?、芷渌僮饔肷鲜銮呋叻掷敕ㄏ嗤?。
(2)斜面接种法
主要用于经划线分离培养所获得的单个菌落的移种,以及观察细菌的某些培养特征。
以菌种移种为例,其接种方法是:
?、偃∫痪止芎团嘌?,置左手食指、中指、无名指间,拇指压住两管底部上侧面,使菌种管位于外侧,培养基管位于内侧;
②右手拇指和食指分别旋松两管棉塞。火焰灭菌接种环;
?、垡杂沂中≈赣胧终疲≈赣胛廾阜直鸺腥∶奕?先外管后内管),将两管口迅速通过火焰1~2次;
?、芙衙鹁慕又只飞烊刖止苤?,从斜面上取菌少许,迅速伸入待接种的培养基管中,在斜面底部向上划一条直线,然后从底部起向上作曲折连续划线,直至斜面上方顶端;
⑤取出接种环,火焰灭菌管口,塞上棉塞(先塞内管);最后将接种环经火焰灭菌放好;
?、拮龊帽晔叮?5℃培养箱中培养18~24小时。斜面培养一般形成均匀一致的菌苔。一般可观察表面、透明度、色泽等特征。
(3)涂布接种法
涂布法接种是一种常用的接种方法,不仅可以用于计算活菌数,还可以利用其在平板表面生长形成菌苔的特点用于检测化学因素对微生物的抑杀效应。
原理:将一定浓度,一定量的待分离菌液移到已凝固的培养基平板上,再用涂布棒快速地将其均匀涂布,使长出单菌落而达到分离的目的。
(4)液体接种法(肉汤接种)
?、偃缧泵娼又址ǔ趾镁止芗芭嘌?;
②灭菌接种环,从菌种管取菌,伸入培养基管中,在接近液面的管壁上方轻轻研磨,并沾取少许培养基液体调和,使细菌混合于培养基的液体中。液体培养基一般以18~24小时培养后观察生长特征。
肉汤培养可观察如下几项:
a.发育程度:有无生长、微弱、中等、旺盛;
b.混浊度:有无及程度(混、中等、微混、透明)、均匀混浊、有颗粒、絮状生长;
c.沉淀:有无及量多少、性状(粉状、颗粒状、絮状、沾性);
d.表面:有无生长、性状(膜状、环状)、菌膜厚薄及表面特征(光滑、颗粒、皱状);
e.其他:有无特殊气味,色素。如果是糖发酵培养基则主要观察是否产酸和有无气体。
(5)穿刺接种法(半固体接种)
多用于保存菌种、观察动力及厌氧培养等也可以用于观察细菌的某些生化反应。
?、偃缧泵娼又址ǔ趾镁止芗芭嘌?;
②以灭菌接种针从菌种管取菌,垂直刺入培养基的中心(半固体或一般琼脂高层)直达近管底部(但不能*刺到管底),接种针应沿原路退出;
③经培养后半固体培养基可观察到:沿穿刺线生长,线外的培养基清亮表示细菌无动力;穿刺线模糊不清,或沿穿刺线向外扩散生长,或整个培养基混浊表示细菌有动力。
立即询价
您提交后,专属客服将第一时间为您服务