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Poroshell 五大金刚之 CS-C18 改善碱性化合物峰形和容量
本研究使用甲酸和乙腈梯度对碱性药物化合物进行了分离。比较了两种表面多孔颗粒填料 C18 色谱柱：表面带电荷的 Agilent InfinityLab Poroshell 120 CS-C18 和传统的 C18 键合相色谱柱。使用简单且普遍适用的甲酸流动相时，这些碱性分析物在带电荷表面色谱柱上获得的峰形优于传统 C18 柱。传统 C18 色谱柱需要使用不太理想的三氟乙酸流动相来改善峰形。进一步的研究表明，带电荷表面色谱柱还提高了碱性分析物的载样量，能够改善杂质分析的检测限。
Poroshell 120 CS-C18 色谱柱将表面多孔型杂化颗粒与表面电荷技术相结合，既保留了高效低压的优势，又能耐受广泛的 pH 范围，满足 LC 和 LC/MS 方法开发高效快速的需求。
系统配置
Agilent 1290 Infinity II 全能泵 (G7104A)
Agilent 1290 Infinity II 样品瓶 进样器 (G7129B)
Agilent InfinityLab 液相色谱系列 集成式柱温箱 (G7130A)
Agilent Ultivo LC/TQ (G6465A)
Agilent 1290 Infinity II 二极管 阵列检测器 (G7117B)
UHPLC方法参数
LC/TQ 采集方法参数
结果与讨论
使用六种化合物标样，比较了3 种分析条件下的性能。色谱图显示了使用简单的甲酸流动相在 InfinityLab Poroshell 120 CS-C18 色谱柱上获得的 6 种碱性药物化合物的分离情况。中间的色谱图展示了使用相同流动相时传统 C18 色谱柱的性能。相比表面带电荷的 C18，传统 C18 色谱柱上获得的峰更宽。底部色谱图显示，使用三氟乙酸流动相可改善传统 C18 色谱柱的峰宽，如峰宽图所示。由于三氟乙酸 pH 值极低，通常被认为是不理想的流动相。低 pH 值可能具有破坏性，且难以从色谱柱和 LC 系统中彻底清除。对于 LC/MS 用户来说，由于三氟乙酸的离子 抑制作用，还会大幅降低信号强度。
碱性药物化合物的色谱性能比较
清楚表明，表面带电荷的 CS-C18 可使阿米替林始终保持较窄的峰形。即使在色谱 柱过载的情况下，其峰宽也始终比其他三 种传统 C18 色谱柱窄。
中等载样量和高载样量下 CS-C18 于传统 C18 之间的性能差异
InfinityLab Poroshell 120 CS-C18 色谱柱更低的过载效应意味着其能在碱性化合物的杂质分析中表现得更出色。在杂质分析中，主要化合物的浓度通常较高，而其他目标分析物的浓度较低。对杂质含量为 0.25%（按重量计）的高浓度阿米替林样品的杂质分析，随载样量增大，传统的 C18 主峰大幅展宽，覆盖了较早洗脱的杂质峰，并且明显的峰拖尾现象影响了晚洗脱的杂质的峰形，而使用Poroshell 120 CS-C18 色谱柱时，主峰仍保持较窄的峰宽，足以与其前后的杂质峰分离。
在 CS-C18 和传统 C18上对阿米替林 +0.25% 杂质进行杂质分析
结论
在简单的甲酸流动相条件下分析碱性分析物时，表面带电荷 Agilent InfinityLab Poroshell 120 CS-C18 色谱柱比传统 C18 键合相具有更出色的性能。获得的峰形更高且更尖锐，提供了更高的分离度和灵敏度。CS-C18 还提高了载样量，并能保持出色的碱性化合物峰形，实现更灵敏的杂质分析。