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紅細胞裂解液的取用規(guī)則和注意事項

閱讀：2627 發(fā)布時間：2022-6-12

　　紅細胞裂解液主要包括植物、動物、微生物基因組DNA的提取與鑒定，哺乳動物組織總RNA的提取與鑒定，質(zhì)粒DNA的提取與鑒定，PCR擴增，分子雜交技術(shù)，限制性內(nèi)切酶消化，分子克隆全過程和基因文庫的構(gòu)建等實驗項目的原理及步驟。經(jīng)過過濾滅菌處理，主要用于流式細胞分析時，裂解液和組織中的紅細胞。也可以用于核酸純化時裂解紅細胞。

　　紅細胞裂解液的取用規(guī)則：

　?。?）試劑不能與手接觸。

　?。?）要用潔凈的藥勺，量筒或滴管取用試劑，不準(zhǔn)用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后，應(yīng)將工具洗凈（藥勺要擦干）后，方可取用另一種試劑。

　?。?）試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊，不可放錯瓶蓋和滴管，絕不允許張冠李戴，用完后將瓶放回原處

　?。?）已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)。

　　紅細胞裂解液的注意事項：

　　1、制備細胞懸液時應(yīng)根據(jù)實驗需要，不一定要制備成單細胞懸液。

　　2、后續(xù)試驗如果是用于細胞培養(yǎng)，操作過程中應(yīng)注意無菌操作，盡量在超凈工作臺內(nèi)操作。

　　3、離心步驟盡量在4℃離心機上操作。

　　4、常規(guī)步驟與快速步驟的區(qū)別在于：常規(guī)步驟多了一步洗滌過程的離心，可以節(jié)省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好，不需要大體積的離心管；快速步驟少了一次離心過程，洗滌效果略差一些，同時需要大體積的離心管。

　　5、離心洗滌后，通常極微量的紅細胞不會影響后續(xù)的檢測。

　　6、如果經(jīng)過處理后的樣品后續(xù)用于總RNA的提取，在處理細胞時不必使用DEPC處理的溶液，即無需在該操作中特意去除RNase。

　　7、為了安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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