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紅細胞裂解液的取用規(guī)則和注意事項

閱讀:2627      發(fā)布時間:2022-6-12
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   紅細胞裂解液主要包括植物、動物、微生物基因組DNA的提取與鑒定,哺乳動物組織總RNA的提取與鑒定,質(zhì)粒DNA的提取與鑒定,PCR擴增,分子雜交技術(shù),限制性內(nèi)切酶消化,分子克隆全過程和基因文庫的構(gòu)建等實驗項目的原理及步驟。經(jīng)過過濾滅菌處理,主要用于流式細胞分析時,裂解液和組織中的紅細胞。也可以用于核酸純化時裂解紅細胞。
 
  紅細胞裂解液的取用規(guī)則:
 ?。?)試劑不能與手接觸。
 
 ?。?)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,不準(zhǔn)用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應(yīng)將工具洗凈(藥勺要擦干)后,方可取用另一種試劑。
 
 ?。?)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后將瓶放回原處
 
 ?。?)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)。
 
  紅細胞裂解液的注意事項:
  1、制備細胞懸液時應(yīng)根據(jù)實驗需要,不一定要制備成單細胞懸液。
 
  2、后續(xù)試驗如果是用于細胞培養(yǎng),操作過程中應(yīng)注意無菌操作,盡量在超凈工作臺內(nèi)操作。
 
  3、離心步驟盡量在4℃離心機上操作。
 
  4、常規(guī)步驟與快速步驟的區(qū)別在于:常規(guī)步驟多了一步洗滌過程的離心,可以節(jié)省洗滌液的用量,并且洗滌效果也更好,不需要大體積的離心管;快速步驟少了一次離心過程,洗滌效果略差一些,同時需要大體積的離心管。
 
  5、離心洗滌后,通常極微量的紅細胞不會影響后續(xù)的檢測。
 
  6、如果經(jīng)過處理后的樣品后續(xù)用于總RNA的提取,在處理細胞時不必使用DEPC處理的溶液,即無需在該操作中特意去除RNase。
 
  7、為了安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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