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核酸提取儀有哪幾種分類方式?應(yīng)該如何分類呢?

閱讀:1405        發(fā)布時間:2021-8-16

核酸提取儀分類

 

1. 根據(jù)儀器型號大小不同劃分 

1) 自動液體工作站

自動液體工作站是功能非常強(qiáng)大的設(shè)備,液體分液、吸液等自動完成,甚至能通過整合擴(kuò)增、檢測等功能,實現(xiàn)標(biāo)本提取、擴(kuò)增、檢測全自動化。提取核酸只是其功能的一個應(yīng)用,不太適合常規(guī)實驗室提取核酸,一般都應(yīng)用在單一類標(biāo)本并且一次提取標(biāo)本量非常大(至少96個,一般幾百個)的實驗需求上。自動工作站的平臺建立及平臺的運作,需要比較大的資金。

2) 小型自動核酸提取儀

小型的自動化儀器是通過運行結(jié)構(gòu)的特殊性來達(dá)到自動提取核酸的目的,可以在任何實驗室得到應(yīng)用。

2. 根據(jù)提取原理不同劃分

1) 采用離心柱法的儀器

離心柱法核酸提取儀主要采用離心機(jī)和自動移液裝置相結(jié)合的方法,通量一般在1-12個樣本,操作時間和手工提取差不多,并不能提高實際工作效率,且價格昂貴,不同型號儀器的耗材也不能通用,僅適合經(jīng)費充足的大型實驗室使用。

2) 采用磁珠法的儀器

以磁珠為載體,利用磁珠在高鹽低PH值下吸附核酸,在低鹽高PH值下與核酸分離的原理,再通過移動磁珠或轉(zhuǎn)移液體來實現(xiàn)核酸的整個提取純化過程。由于其原理的*性,所以可設(shè)計成很多種通量,既可以單管提取,也可以提取8-96個樣本,且其操作簡單快捷,提取96個樣本僅需30-45min,大大提高了實驗效率,且成本低廉,因而可以在不同實驗室使用,是目前市場上的主流儀器。

磁珠法自動核酸提取儀又分為磁棒法和抽吸法

先說抽吸法:顧名思義,抽吸法就是通過自動移液裝置來進(jìn)行,通過自動移液裝置來加入裂解液、磁珠吸附;抽走裂解液,加入漂洗液,磁珠吸附,抽走漂洗液,加入洗脫緩沖液。從步驟上好像沒什么問題,但是抽吸法的問題在于,為了在去除廢液的時候不抽走磁珠,移液器不能靠磁珠太近,以防磁珠連同廢液被抽掉,這樣每一次抽廢液的時候總有一小部分不能*的抽走,特別是磁鐵在底部的裝置,因為磁珠被磁鐵吸附在底部,所以移液器不能靠底部太近,這樣漂洗液就不能*去除,殘留的漂洗液中的鹽和乙醇會影響后面的洗脫效率和PCR成功率;磁鐵在側(cè)面的裝置殘留的液體會少些,但是洗脫的效率也不好,依靠DNA自行溶解到洗脫緩沖液中,除非等上半小時以上,所以有些96自動核酸提取工作站,提取一輪的時間需要150分鐘,32磁棒法的同樣的時間可以提5輪了。

再說磁棒法核酸提取儀:通量通常有8、16、32、96通道,相對于抽吸法,磁棒法的優(yōu)點是每一步的液體不殘留,因為磁棒只帶走磁珠,轉(zhuǎn)移到下一個步驟相應(yīng)的反應(yīng)孔中,另外選擇磁棒法的提取儀器要功能更齊全的,比如可以加熱,每個加熱槽獨立溫控,這樣可以設(shè)置加熱、裂解、洗脫的不同溫度,另外很重要的一點是,帶動磁棒的電機(jī)要能帶動磁棒進(jìn)行液體的快速混勻和攪拌,這樣才有利于自動化和有助于裂解和漂洗*。磁棒法的通量選擇是32通道,96通道的看似通量更高,但是有個很現(xiàn)實的問題,96個磁力棒在從一個板轉(zhuǎn)移至另外一個板的時候,磁力棒上面的液體中途滴下來怎么辦,它會滴到別的孔中造成污染,而32通道的磁力棒運行軌跡不經(jīng)過其他樣本的上空,這樣不會交叉污染。

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