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增強型黃色熒光蛋白（EYFP）簡介
在綠色熒光蛋白的晶體結構研究中發(fā)現(xiàn)203位接近生色團后，對黃色熒光蛋白家族的研究才開始。將203位突變可以穩(wěn)定生色團在激發(fā)狀態(tài)的偶極矩，這樣可以使激發(fā)光和發(fā)射光的波長均增加20nm。并改造成增強黃色熒光蛋白（EYFP）。EYFP的亮度和發(fā)射光譜的有機結合使得這一熒光探針在熒光多色成像中得到很好的應用。EYFP還可以與增強青色熒光蛋白（ECFP）或GFP2一起應用到FRET中。然而，黃色熒光蛋白也存在對酸性條件非常敏感，pH6.5時會失去近50%的熒光。EYFP對氯離子非常敏感，光漂白現(xiàn)象比綠色熒光蛋白還嚴重。
EYFP的產(chǎn)生主要依賴于對野生型GFP的發(fā)色團周圍微環(huán)境的改造。相對于avGFP，最大的突變在于取代了Thr203。當熒光蛋白折疊時，Tyr203的酚基將會伸入到熒光蛋白內(nèi)部的空腔，并且與發(fā)色團的酚基團在空間上形成了π-π疊加相互作用。這種突變穩(wěn)定了發(fā)色團的激發(fā)態(tài)偶極矩，從而使得GFP的吸收光譜和發(fā)射光譜整體向長波方向平移約20 nm左右。另外Gln69向Lys的突變增強了發(fā)色基的離子化，將發(fā)射波長向長波方向進一步移動了1-2 nm。
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以上資料來自小編MSQ,2023.09.27
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