普諾賽直播課
在8月20日普諾賽直播間中，左明祥老師為大家?guī)砹?strong style="-webkit-tap-highlight-color: transparent; margin: 0px; padding: 0px; outline: 0px; max-width: 100%; box-sizing: border-box !important; overflow-wrap: break-word !important; visibility: visible;">《細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境要求和監(jiān)測方法》的專題課程。
直播回放路徑
①可在“武漢普諾賽"微信視頻號查看；
②B站搜索“普諾賽生物"，點(diǎn)擊最新視頻觀看學(xué)習(xí)。
每一份好奇心都是推動(dòng)科學(xué)進(jìn)步的力量，針對大家在直播中提出的問題，我們特意邀請左老師為大家進(jìn)行深入解答。
另外，我們誠摯地歡迎大家在評論區(qū)暢所欲言。無論是實(shí)驗(yàn)技術(shù)問題還是感興趣的課程主題，我們都將傾聽您的每一個(gè)意見并積極回應(yīng)，也會根據(jù)大家的需求定制專題講座。感謝您的參與和關(guān)注！
直播問題解答
問
過濾器和水盤如何清潔？
在正常情況（未出現(xiàn)污染）下，培養(yǎng)箱的水盤應(yīng)使用75%酒精擦拭消毒，然后加入無菌水并添加適量的抑菌劑。當(dāng)培養(yǎng)箱出現(xiàn)污染時(shí)，可以使用新潔爾滅消毒液或3%的過氧化氫消毒液對水盤進(jìn)行消毒，消毒時(shí)間為30 min。此外，也可以使用紫外燈進(jìn)行消毒處理，消毒完成后用無菌水擦拭干凈，添加無菌水和抑菌劑后正常使用。
培養(yǎng)箱內(nèi)的HEPA過濾器一般不需要單獨(dú)清潔，當(dāng)使用出現(xiàn)異常時(shí)可以進(jìn)行更換（需要專業(yè)維修人員更換）。對于超凈工作臺和生物安全柜中的過濾器，只需根據(jù)實(shí)際使用情況，定期（半年至一年）更換初效濾網(wǎng)即可。
問
消毒時(shí)間多久合適？
使用消毒液消毒，時(shí)間30 min左右即可；若使用的消毒液存在腐蝕性，應(yīng)在消毒完成后使用無菌水將消毒液擦拭干凈。使用臭氧或紫外燈的消毒時(shí)間一般也是30 min。
問
怎樣檢測二氧化碳泄漏？
如果需要檢測泄漏至空氣中的CO2濃度，防止其濃度過高可能引發(fā)的窒息風(fēng)險(xiǎn)，可以使用專門的CO2濃度檢測儀，或者使用氧氣濃度監(jiān)測儀（適用于多種氣體環(huán)境，如含CO2或氮?dú)獾模?/p>
如果是要檢測管道泄漏的位置，初步的檢查方法可以是使用肥皂水在管道的接頭位置進(jìn)行涂抹，觀察是否出現(xiàn)氣泡；如需要準(zhǔn)確檢測，則需專業(yè)人員使用專業(yè)檢測工具進(jìn)行檢測。
問
細(xì)胞培養(yǎng)間的實(shí)驗(yàn)服怎么消毒和存放比較合適？
實(shí)驗(yàn)服在清洗完成之后，可以放在專用的滅菌袋中，再放進(jìn)高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌處理。滅菌完成后，將實(shí)驗(yàn)服連同滅菌袋一起放入烘箱中烘干備用。
問
臭氧消毒適用于什么實(shí)驗(yàn)室？
臭氧消毒適用于配套有新風(fēng)系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室。臭氧一般需要通過新風(fēng)系統(tǒng)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室空間，并在空間內(nèi)達(dá)到一定濃度才能起到較好的消毒效果。消毒完成之后，也需要通過新風(fēng)系統(tǒng)將殘留的臭氧排出實(shí)驗(yàn)室，否則會對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境產(chǎn)生影響。
問
支原體檢測沒有污染，但細(xì)胞狀態(tài)不好，考慮什么污染呢？
細(xì)胞狀態(tài)不好的因素有很多，首要且關(guān)鍵的一步是排除污染因素。如果通過各種檢測手段（細(xì)菌、真菌通過瓊脂板或空培檢測，支原體使用試劑盒檢測）都無法檢測到污染，則可能不是因污染導(dǎo)致的。
如果仍懷疑存在污染，可以嘗試向培養(yǎng)物中添加適當(dāng)濃度的廣譜抗生素。如果添加抗生素后細(xì)胞狀態(tài)明顯好轉(zhuǎn)，說明確實(shí)存在某種難以檢測的微生物影響細(xì)胞狀態(tài)；如果添加抗生素后細(xì)胞狀態(tài)未出現(xiàn)好轉(zhuǎn)甚至更差，則需從其他方面排查細(xì)胞狀態(tài)不好的原因，如培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)條件、細(xì)胞特性或外部操作因素等。
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