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拿到雞卵泡顆粒細(xì)胞應(yīng)執(zhí)行以下操作

閱讀:2115      發(fā)布時(shí)間:2022-3-14
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  雞卵泡顆粒細(xì)胞是卵巢的主要功能細(xì)胞,它們的增殖和分化直接影響卵巢功能活動(dòng),如卵泡的生長起始、發(fā)育、排卵、黃體形成和類固醇激素的分泌,細(xì)胞呈圓形或橢圓形。細(xì)胞總數(shù)約5×105個(gè)/瓶,細(xì)胞純度高達(dá)80%以上,不含HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
  從雞卵泡組織中分離出雞卵泡顆粒細(xì)胞;成熟卵泡是卵巢的結(jié)構(gòu)成分之一。卵泡腔大,卵丘明顯。卵泡的子宮內(nèi)膜細(xì)胞靠近卵泡的顆粒層,它們之間有基底膜。子宮內(nèi)膜細(xì)胞呈多角形,胞質(zhì)清晰,核圓形。細(xì)胞間可見許多毛細(xì)血管。外膜細(xì)胞位于最外層,多呈梭形,與周圍結(jié)締組織無明顯界限。卵泡內(nèi)的卵母細(xì)胞周圍有一層菱形或扁平細(xì)胞。當(dāng)卵泡開始發(fā)育,卵細(xì)胞生長時(shí),周圍的菱形細(xì)胞變成立方體,由單層長成多層。由于其細(xì)胞質(zhì)中有顆粒,故稱為顆粒細(xì)胞。初級卵泡的顆粒細(xì)胞為單層;次級濾泡的顆粒細(xì)胞增加至多層;成熟卵泡的顆粒細(xì)胞膨脹并成為單層。顆粒細(xì)胞核大而圓,顏色深。細(xì)胞的自由表面有許多細(xì)長的突起延伸到輻射區(qū)的凹陷處。

 

雞卵泡顆粒細(xì)胞
 

 

  收到雞卵泡顆粒細(xì)胞后,檢查外包裝是否完整,細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。并執(zhí)行以下操作:
  1、用1.75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
  2、將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中,并在處理前預(yù)熱3-4小時(shí),以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
  3、預(yù)熱*培養(yǎng)基(包括1%雙抗體)。
  4、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,對不同倍數(shù)(40×、100×、200×各1個(gè))的細(xì)胞進(jìn)行拍照。
  5、如果細(xì)胞密度小,無菌操作,除去培養(yǎng)基。向每瓶中加入5-6ml步驟4中制備的培養(yǎng)基。將其放入37度的培養(yǎng)箱中。當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%以上時(shí),傳代培養(yǎng)。如果細(xì)胞密度大,達(dá)到80%以上,則進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

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