目錄:江蘇齊氏生物科技有限公司>>遺傳毒理系列產(chǎn)品>>Ames試驗(yàn)菌株>> 6-1705WP2uvrA大腸桿菌 (Ames試驗(yàn)）
| 供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 10管/套 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 6-1705 | 主要用途 | Ames試驗(yàn) |
WP2uvrA大腸桿菌 (Ames試驗(yàn)）
遺傳毒性試驗(yàn)在食品、藥物、化妝品、環(huán)境等各領(lǐng)域安全檢測及評價(jià)上得到了廣泛應(yīng)用。其中比較常見的是Ames試驗(yàn)，也是經(jīng)典的測試化學(xué)物或藥物致突變實(shí)驗(yàn)，該法測定主要在培養(yǎng)皿中進(jìn)行，具有簡單、快速、精確而又靈敏的特點(diǎn)，被世界各國廣泛采用。為了使以上試驗(yàn)條件更接近于哺乳動物的代謝情況，在測試系統(tǒng)中加入哺乳動物微粒體酶（S9)，可彌補(bǔ)體外試驗(yàn)缺乏代謝活化系統(tǒng)之不足。
齊氏生物提供的沙門 氏菌株（TA97a、TA98、TA100、TA102、TA1535）和 WP2uvrA大腸桿菌 (Ames試驗(yàn)）, 經(jīng)過鑒定，菌株特性與活菌數(shù)量符合Ames試驗(yàn)國家標(biāo)準(zhǔn)，并以甘油菌的形式提供，融化后可直接使用。 為了保證試驗(yàn)效果，建議搭配齊氏生物研發(fā)的S9代謝活化系統(tǒng)一起使用。 
保存條件：干冰運(yùn)輸，-80℃保存。
注意事項(xiàng)：
在使用過程中要特別注意避免培養(yǎng)基污染菌株。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的健康和安全，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴好一次性手套進(jìn)行無菌操作。
延伸閱讀
Ames鼠傷寒沙門氏桿菌回復(fù)突變試驗(yàn)-ISO 10993-3,GB/T 16886.3,YY/T 0127.10
Ames試驗(yàn)全稱鼠傷寒沙門氏桿菌回復(fù)突變試驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮驮希?/span>
鼠傷寒沙門氏菌（Salmonella typhimurium）的組氨酸營養(yǎng)缺陷型（his－）菌株，在含微量組氨酸的培養(yǎng)基中，除極少數(shù)自發(fā)回復(fù)突變的細(xì)胞外，一般只能分裂幾次，形成在顯微鏡下才能見到的微菌落。受誘變劑作用后，大量細(xì)胞發(fā)生回復(fù)突變，自行合成組氨酸，發(fā)育成肉眼可見的菌落。某些化學(xué)物質(zhì)需經(jīng)代謝活化才有致變作用，在測試系統(tǒng)中加入哺乳動物微粒體酶，可彌補(bǔ)體外試驗(yàn)缺乏代謝活化系統(tǒng)之不足。
菌株鑒定
用于測試的菌株，需經(jīng)基因型和生物學(xué)性狀鑒定，符合要求才能投入使用。
鑒定前先進(jìn)行增菌培養(yǎng)。為鑒定結(jié)果可靠，需同時(shí)培養(yǎng)野生型TV菌株，作為測試菌基因型之對照。增菌培養(yǎng)用牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基，接種后于37℃，100r/min振蕩培養(yǎng)12h左右，細(xì)菌生長相為對數(shù)期末，含菌數(shù)應(yīng)為1×109個(gè)/ml～2×109個(gè)/ml。
鑒定項(xiàng)目：
（1）脂多糖屏障丟失（rfa）用接種環(huán)或一端撓起的接種針以無菌操作術(shù)取各菌株的增菌培養(yǎng)液，在營養(yǎng)瓊脂平板上分別劃平行線，然后用滅菌尖頭鑷夾取滅菌濾紙條，浸濕結(jié)晶紫溶液，貼放在平板上與各接種平行線垂直相交。蓋好皿蓋后倒置于37t溫箱，培養(yǎng)24h后觀察結(jié)果。
（2）R因子劃線接種，貼放濾紙條及培養(yǎng)等均同上，唯濾紙條浸濕的藥液不同，為氨芐青霉素鈉溶液。TA102除pKM101外，還有pAQ1，載有抗四環(huán)素的基因，故另用濾紙條浸濕四環(huán)素溶液后貼放于劃線接種的平板上。
（3）紫外線損傷修復(fù)缺陷（△uvrB）在營養(yǎng)瓊脂平板上按上述方法劃線接種后，一半接種線用黑玻璃遮蓋，另一半暴露于紫外光下8sec，然后蓋好皿蓋并用黑紙包裹平皿，防止可見光修復(fù)作用。培養(yǎng)同上。
（4）自發(fā)回變預(yù)先制備底平板；向滅菌并在水浴內(nèi)保溫45℃的上層軟瓊脂中注入0.1ml菌液；混勻后傾于底平板上并鋪平。平皿倒置于37℃溫箱培養(yǎng)48h。
（5）回變特性——診斷性試驗(yàn)上層軟瓊脂中除菌液外，還注入已知陽性物之溶液，需活化系統(tǒng)者并加入S9mix，余同上。
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