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上海禾午生物科技有限公司
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当前位置:上海禾午生物科技有限公司>>质粒菌株>>质粒>> P72354pT3-EF1a-HA

pT3-EF1a-HA

参  考  价面议
具体成交价以合同协议为准

产品型号P72354

品       牌禾午生物

厂商性质生产商

所  在  地上海

更新时间:2025-06-15 07:50:40浏览次数:95次

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供货周期 两周 规格
货号 P72354 应用领域 医疗卫生,生物产业,制药/生物制药
主要用途 仅供科研
名称pT3-EF1a-HA
别称-
质粒宿主哺乳细胞
质粒用途蛋白表达

名称pT3-EF1a-HA
别称-
质粒宿主哺乳细胞
质粒用途蛋白表达
片段类型ORF
片段物种空载体
原核抗性Amp
启动子EF1a
复制子pUC
感受态DH5a
温度37度
背景载体pT3-myr-AKT-HA(mouse)
正向引物PEF-F

 


注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。


1
、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl~50μl无菌水或 pH8.0  1*TE缓冲液来溶解质粒,室温放置1min;

2
、从-80冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

3
、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;

4
42热激90s,再冰浴2min;

5
、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;

6
6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

7
、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

8
、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h

9
、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒


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