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上海禾午生物科技有限公司
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當(dāng)前位置:上海禾午生物科技有限公司>>質(zhì)粒菌株>>質(zhì)粒>> P69939PiggyBac-U6-MCS-sgRNA-Cas9-Puro

PiggyBac-U6-MCS-sgRNA-Cas9-Puro

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號P69939

品       牌禾午生物

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海

更新時間:2025-06-02 17:48:52瀏覽次數(shù):69次

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供貨周期 兩周 規(guī)格
貨號 P69939 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥
主要用途 僅供科研
名稱PiggyBac-U6-MCS-sgRNA-Cas9-Puro
別稱-
質(zhì)粒宿主哺乳細胞
質(zhì)粒用途基因編輯

名稱PiggyBac-U6-MCS-sgRNA-Cas9-Puro
別稱-
質(zhì)粒宿主哺乳細胞
質(zhì)粒用途基因編輯
片段類型CRISPR
片段物種空載體
原核抗性Amp
篩選標記Puro
啟動子CMV
復(fù)制子pUC
感受態(tài)Stbl3
溫度37度
背景載體PiggyBac Dualpromoter
反向引物Sv40-polyA-R

 

注意事項:轉(zhuǎn)化前請準確查找該質(zhì)粒相應(yīng)的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。


1
、收到質(zhì)粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質(zhì)粒,室溫放置1min;

2
、從-80冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標記;

3
、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min

4
、42熱激90s,再冰浴2min;

5
、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min

6
、6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7
、混勻后的菌液加至對應(yīng)抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8
、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h;

9
、挑取單克隆菌落至對應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實驗需要提取質(zhì)粒


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