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上海禾午生物科技有限公司
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当前位置:上海禾午生物科技有限公司>>质粒菌株>>质粒>> P68002pTLCV2-U6-NNMT(human)-sgRNA2-Cas9-EGFP-EF1a-Puro

pTLCV2-U6-NNMT(human)-sgRNA2-Cas9-EGFP-EF1a-Puro

参  考  价面议
具体成交价以合同协议为准

产品型号P68002

品       牌禾午生物

厂商性质生产商

所  在  地上海

更新时间:2025-05-20 13:12:00浏览次数:72次

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供货周期 两周 规格
货号 P68002 应用领域 医疗卫生,生物产业,制药/生物制药
主要用途 仅供科研
名称pTLCV2-U6-NNMT(human)-sgRNA2-Cas9-EGFP-EF1a-Puro
质粒宿主哺乳细胞
质粒用途基因编辑

名称pTLCV2-U6-NNMT(human)-sgRNA2-Cas9-EGFP-EF1a-Puro
质粒宿主哺乳细胞
质粒用途基因编辑
片段类型CRISPR
片段物种
原核抗性Amp
筛选标记Puro
荧光标记绿色
启动子U6
复制子pUC
感受态DH5a
温度37度
背景载体TLCV2
正向引物U6-F


注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。


1
、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl~50μl无菌水或 pH8.0  1*TE缓冲液来溶解质粒,室温放置1min;

2
、从-80冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

3
、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;

4
、42热激90s,再冰浴2min;

5
、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;

6
、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

7
、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

8
、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;

9
、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒


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