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一、细胞基本属性
细胞名称：NB-4（人急性早幼粒白血病细胞）
细胞别称：NB-4; NB4; NB.4
细胞货号：SNL-175
细胞种属：人
生长情况：悬浮
培养条件：1640+10%FBS+1%双抗
培养环境：air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、细胞培养操作
换液周期：2-3天
培养基体积：T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
传代比例：1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）
传代方法：
1.混匀细胞，收集细胞培养基，900rpm离心3-5min，弃上清；
2.加新的*培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；
3.补足*培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；
注意事项：部分悬浮细胞会附着瓶底，轻轻晃动培养基或者吹打细胞面就会脱落，不需要胰M消化。建议使用培养皿培养，更适合吹打细胞操作，吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
三、细胞冻存操作
冻存液配方：92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%*培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格：200-300万/ml，1ml每管
冻存方法：
1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞；
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；
3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存
注意事项：冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案
Tips：
1.细胞悬浮圆形生长，小聚团也有部分散开生长；
2.圆形透亮、细胞膜完整的细胞是活细胞，如果无法判断，可以取少量细胞用台盼蓝染色后计数确定细胞活率；
3.悬浮细胞密度维持1E5-5E5/ml之间，密度过低或者过高可能会影响细胞状态；

我们推荐使用尚恩生物NB-4（人急性早幼粒白血病细胞）*培养基（产品货号：SNLM-175）作为体外培养的培养基。