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影響毛細(xì)管電泳儀峰面積重現(xiàn)性的因素及解決辦法

閱讀：2187      發(fā)布時間：2021-3-3
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  　　毛細(xì)管電泳儀分析對進樣技術(shù)要求很高，進樣操作事項如下：
　　1.進樣區(qū)帶越小越好：無論采用何種進樣方式，毛細(xì)管插入樣品溶液的深度一般要少于毛細(xì)管總長度的1%～2%，以盡量減少樣品溶液經(jīng)毛細(xì)吸附進入毛細(xì)管而影響進樣量的性。樣品管中溶液少為5μL，進樣體積為1～50nL。
　　2.進樣時間以短為宜：通常進樣時間為0.5～1s，此時毛細(xì)管粘附的樣品量相對于吸入的體積可忽略不計。雖然毛細(xì)管電泳的進樣時間可至±0.1s，但由于毛細(xì)管插入樣品管時不可避免地會粘附一些溶液，進樣時間過短會影響分析的重復(fù)性。
　　3.樣品預(yù)濃縮：受毛細(xì)管內(nèi)總體積的制約，對于濃度很稀的樣品，毛細(xì)管電泳不能象HPLC那樣可加大進樣量來提高檢測靈敏度，但可采取一些措施來改善。
　　毛細(xì)管電泳儀峰面積重現(xiàn)性的因素及解決辦法：
　　1.溫度變化。
　　原因與結(jié)果：改變粘度和進樣量。
　　解決辦法：毛細(xì)管恒溫。
　　2.樣品蒸發(fā)。
　　原因與結(jié)果：增加樣品濃度。
　　解決辦法：加蓋和冷卻自動進樣器。
　　3.樣品過載。
　　原因與結(jié)果：額外進樣。
　　解決辦法：使用進樣端平滑的毛細(xì)管。
　　4.毛細(xì)管插入樣品引起零進樣。
　　原因與結(jié)果：額外進樣。
　　解決辦法：不能消除，但能量化。
　　5.毛細(xì)管電泳儀分壁吸附樣品。
　　原因與結(jié)果：峰形畸變無樣品流出。
　　解決辦法：改變緩沖液pH值，增加濃度，使用添加劑。
　　6.信噪比低。
　　原因與結(jié)果：積分誤差。
　　解決辦法：優(yōu)化積分參數(shù)，增加樣品濃度，用峰高測定。
　　7.電動進樣。
　　原因與結(jié)果：樣品基質(zhì)不同。
　　解決辦法：采用壓力進樣。

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