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由于超濾離心管使用不恰當(dāng)，導(dǎo)致蛋白損失很大如何處理呢？

閱讀：4649 發(fā)布時間：2021-11-16

　　由于超濾離心管使用不恰當(dāng)或是超濾知識缺乏引起的問題，簡直成了實驗汪們蛋白實驗不成功、效率低下的最常見原因之一。比如說：
　　為什么截留分子量選擇沒錯，蛋白有時候卻會漏出在濾出液中？

　　導(dǎo)致漏蛋白甚至檢測不到蛋白的原因很復(fù)雜，應(yīng)優(yōu)先根據(jù)樣品調(diào)整工藝，因為同一種膜、截留分子量和裝置組合對于不同的蛋白質(zhì)類別甚至物種而言可能并非*之選。

　　超濾離心管在選擇過程中，應(yīng)首先執(zhí)行以下步驟：

　　1、考慮樣品和分子特性：比如改變pH可能增加構(gòu)象改變的風(fēng)險，而降低溫度可能降低濃縮效率等。

　　2、選擇正確的膜：超濾沒有太多的膜選項，但您應(yīng)對再生纖維素（RC）、Hydrosart®和聚醚砜（PES）材料進行測試，以確定哪種材料可為您的特定材料提供低的非特異性結(jié)合和*的回收率。

　　3、選擇合適的截留分子量，通常是靶標1/3大小的截留分子量適合。但有時則需要更小的孔徑來滿足回收率的要求。如果在病毒和核酸樣品，可參看下面截留分子量和病毒顆粒分子大小以及核酸大小的換算表。

　　4、選擇合適的裝置：賽多利斯擁有適用于低濃度樣品、DNA、蛋白質(zhì)、病毒、過濾應(yīng)用等廣泛的裝置選項；選擇合適的裝置可以有效改善結(jié)果。

　　5、使用合適的裝置處理方法：例如預(yù)沖洗以去除分析物或用非干擾蛋白沖洗以鈍化結(jié)合位點并減少損失。

　　6、考慮樣品控制方法，例如使用裝置內(nèi)的“死體積”移走所有截留物，或預(yù)灌裝濾液管以控制截留物的最終體積。