2010 年7月，一則“乳制品致嬰兒性早熟”的新聞報道引起了社會廣泛的關(guān)注。這是至08 年“三鹿奶粉”事件之后，又一起有關(guān)乳制品食品安全事件。事件一出，農(nóng)業(yè)部立即出臺檢測方法，對相關(guān)奶粉中的激素進行檢測，檢測結(jié)果為：該乳品中激素含量水平均在國家限定范圍內(nèi)。此次事件中人們對嬰兒食用奶粉中的雌激素和孕激素水平是否超標的問題引起了廣泛的討論，同時對激素類物質(zhì)檢測的相關(guān)指標提出了更高的要求。曾有專家指出目前在我國還沒有專門針對奶粉中激素檢測的專門的國家標準檢測方法，所采用的是動物性食品中激素檢測方法。針對這一問題，沃特世推出了UPLC®-XevoTM TQ 質(zhì)譜系統(tǒng)，專門針對奶粉中雌激素和孕激素物質(zhì)進行快速檢測與定量分析。 

沃特世UPLC-Xevo TQ 系統(tǒng)對奶粉中性激素快速檢測的原理 
首先利用UPLC （超液相色譜）的超分離能力實現(xiàn)對被檢測的奶粉的有效分離，并采用Xevo TQ 的InliStartTM 功能快速方便建立質(zhì)譜，PICS （子離子確認掃描）功能輔助定性，以及應用Quanpedia （方法庫）自動導入和導出生成MRM 方法及液相方法，zui后通過利用UPLC/Xevo TQ 的正負電離模式快速切換功能,實現(xiàn)一次進樣，同時檢測多種激素（7種雌激素，6種孕激素），明顯縮短檢測周期,提高檢測通量。 

分析條件與步驟 
本試驗適用于分析外源性激素類物質(zhì)，如果分析內(nèi)源性物質(zhì)可對檢測樣品進行酶解，酶解后的處理方法相同。 
樣品前處理 
■ 稱取1g 奶粉樣品于8ml 水中，充分混勻，超聲5min 
■ 在混勻液中加入1ml 冰醋酸，酸化后再添加16ml 乙腈進一步沉淀水溶性蛋白。7500rpm 離心10min ，取上清液于氮氣流下吹至乙腈含量<5% 
■ 分別用6ml 甲醇、6ml 水活化平衡Oasis HLB（200mg/6cc） 小柱 
■ 上樣，流速控制在3-4ml/min 
■ 清洗：分別用6ml 酸洗（5% 甲醇、2% 冰醋酸）、6ml 堿洗（5% 甲醇、2% 氨水）、6ml 甲醇水溶液（10% 甲醇）進行清洗 
■ 將清洗后的Oasis HLB 小柱抽干10min 
■ 乙酸乙酯/甲醇（9/1 v/v ）活化氨基小柱（Sep-pak NH2 500mg/6cc ），活化平衡后與Oasis HLB 柱串聯(lián) 
■ 洗脫: 分別用6ml 乙酸乙酯/甲醇（9/1 v/v ）、6ml5% 氨水甲醇溶液洗脫串聯(lián)后的兩根柱子，收集洗脫液 
■ 氮氣流下吹干洗脫液至0.2ml 
■ 依次加入0.4ml 乙腈、0.4ml 水溶液，分別渦旋，使zui終體積為1ml ，其中乙腈與水的比例為1:1 
■ 7000rpm 離心10min 或過膜，收集上清液于UPLC/MS/MS 分析 

LC 條件 
LC 系統(tǒng)：ACQUITY UPLC®系統(tǒng) 
色譜柱：ACQUITY UPLC HSS T3，2.1×50mm，1.8µm 
柱溫：40℃ 
樣品室溫度：10℃ 
流速：0.6mL/min 
流動相A： 乙腈 
流動相B：水 
梯度： 


弱洗針溶液：10% 乙腈水溶液 
強洗針溶液：90% 乙腈水溶 
總運行時間：6min 
進樣體積：5µL ，不充滿定量環(huán)（針溢出） 
MS 條件 
MS 系統(tǒng)：Xevo TQ MS 
電離模式：ESI+/ESI 
¬噴霧電壓：3.2kv（ESI+）/2.8kv（ESI-） 
脫溶劑氣：氮氣，1000L/Hr，450℃ 
錐孔氣：氮氣，50L/Hr 
源溫度：150℃ 
采集模式：多反應監(jiān)測（MRM） 其他質(zhì)譜參數(shù)： 

數(shù)據(jù)采集與處理 
本試驗數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)為Waters® MassLynxTM 4.1 SCN729，質(zhì)譜方法開發(fā)用此軟件的InliStart功能，不需要有經(jīng)驗的質(zhì)譜操作人員進行方法開發(fā)與優(yōu)化，同時配合TargetLynx®軟件，只需設(shè)置幾個參數(shù)即可得到完整的報告。InliStart功能可同時開發(fā)正負離子質(zhì)譜參數(shù)，并實現(xiàn)一次進樣正負離子同時掃描