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智能細(xì)胞株篩選系統(tǒng)有什么好處?

閱讀:1154      發(fā)布時間:2023-1-18
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  智能細(xì)胞株篩選系統(tǒng)主要是用來篩選那些不表達(dá)特定蛋白的細(xì)胞株,這個系統(tǒng)需要專門的培養(yǎng)皿,在使用中如果沒有合適的培養(yǎng)液,培養(yǎng)過程就會出現(xiàn)很多的問題。我們可以用液氮作為培養(yǎng)液,但是液氮需要冷凍,保存溫度不能太低也不能太高。如果使用-80度左右就可以了。
  
  將培養(yǎng)中的單個或多個細(xì)胞懸浮于無菌液體中形成懸浮液,加入生長因子和抗菌藥物后進行培養(yǎng)。待生長因子濃度達(dá)到一定程度后,我們將其進行離心分離。然后在液氮中進行冷凍干燥后保存:(-80度)-30min使用智能細(xì)胞株篩選系統(tǒng)來篩選細(xì)胞株。其中一些細(xì)胞株可以在培養(yǎng)液中穩(wěn)定生長過一年!
 
  

智能細(xì)胞株篩選系統(tǒng)

 

  1、用于誘導(dǎo)表達(dá):將經(jīng)過誘導(dǎo)的細(xì)胞用含有藥物的培養(yǎng)液和含有其它不同類型藥物的培養(yǎng)液連續(xù)培養(yǎng)7天以上,然后收集所有細(xì)胞進行計數(shù)(以單克隆或群體計數(shù))。
  
  2、用于分泌蛋白篩選:將通過誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得的可在血清中穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白或mRNA的細(xì)胞分離提取純化得到抗體后分離,然后用含有抗菌藥物L(fēng)-巖藻糖苷酸(LTA)和其它各種不同抗菌藥物成分濃度為500μg/ml、30000μg/ml和30000nM的處理后進行離心得到粗蛋白(>20kDa)后離心提取總蛋白表達(dá)分析,篩選可表達(dá)目的蛋白或mRNA。

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