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详细介绍
产品简介
DH10Bac 菌株主要用于生产重组杆状病毒分子（Bac-to-Bac 杆状病毒表达系统）。该菌株中含有父
本 bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124；其中， bMON14272 中包含 mini-F 复制子, 卡那抗
性基因, attTn7 位点和 lacZα 互补因子；而辅助质粒 pMON7124 含有 tnsABCD 区，可表达转座蛋白
来帮助把供体质粒上的 mini-Tn7 插入到父本的 bacmid 上的靶标位点。当 DH10Bac 感受态细胞转化
了在多克隆位点克隆了外源片段的供体质粒(如 pFastBac)时，该菌株可生成复合 bacmid。DH10Bac
菌株携带 ?80lacZΔM15 突变，因此可用于蓝白斑筛选实验。经 pUC18 质粒转化检测，DH10Bac 感
受态细胞的转化效率可达 108 cfu/μg DNA。
产品组成
组分
DH10Bac
化学感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- mcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ?M15 ?lacX74 recA1 endA1 araD139 ?(ara, leu)7697 galU galK λ- rpsL
nupG /pMON14272 / pMON7124
存储条件
-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 将待转化DNA加入到100 μL感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育30 min；
3. 将离心管置于42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激90s后，立刻置于冰浴中静置2-3 min；
4. 向离心管中加入900 μL LB或SOC培养基（室温或37 ℃预热），后置于37 ℃摇床复壮45 min；
5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；
2. 加入的待转化DNA的总体积不应超过感受态细胞体积的1/10；
3. 加入待转化DNA后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；
4. 为确保优良转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。
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