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详细介绍
产品简介
Stbl3 菌株来源于大肠杆菌 HB101 菌株，是慢病毒载体系统推荐使用的菌株。基因组带有重组酶
recA13 突变，可有效抑制长片段末端重复区的重组，降低错误重组的概率；但由于菌株不含核酸
酶 endA1 突变，因此体内核酸酶含量较高，在提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中的去蛋白液进
行处理，否则抽提出的质粒很不稳定，易降解。此菌株具有链m素抗性，不存在 lacIqZΔM15，不
可用于蓝/白斑筛选实验。经 pUC18 转化检测，Stbl3 感受态细胞的效率可达 108 cfu/μg DNA。
产品组成
组分
Stbl3 化学感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- mcrB mrr hsdS20(rB- mB- ) recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20 (StrR) xyl-5 λ- leu mtl-1 endA1+
存储条件
-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
产品特性
-属于大肠杆菌 K 株系列，主要用于目标基因的克隆和质粒的保存；不可用于以 T7 RNA 聚合酶为
表达系统的蛋白表达；
-该菌株适合克隆不稳定插入片段，甲基化的基因组序列，以及慢病毒载体的构建。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留；
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90 s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min；
4. 向离心管中加入900 μL LB或SOC培养基（室温或37 ℃预热），然后置于37 ℃摇床复壮45 min；
5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；
3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；
4. 为确保优良转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔
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