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详细介绍
产品简介
XL1-Blue MRF'Kan 菌株来源于 XL1-Blue 株系，属于限制酶系统缺失型菌株，且具有卡那m素抗性
(KanR)。recA1和endA1基因的突变有利于插入外源DNA片段的稳定性和高纯度质粒DNA的提取。
hsdR17 突变导致 EcoK 核酸内切酶系统缺失，同样提高了外源 DNA 的稳定性和提取质量。
lacIqZΔM15 的存在使 XL1-Blue MRF’Kan 菌株可用于蓝、白斑筛选实验。XL1-Blue MRF'Kan 感受
态细胞经特殊工艺制作，pUC18 质粒检测转化效率>108 cfu/μg DNA。
产品组成
组分
XL1-Blue MRF' Kan
感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：?(mcrA)183 ?(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac [F'proAB
lacIqZ?M15 Tn5 (KanR)]
存储条件
-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留；
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；
4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；
5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；
3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；
4. 为确保优良转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。
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