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详细介绍
产品简介
HMS174菌株是大肠杆菌K-12的衍生菌株，含有recA突变。HMS174(DE3)含有溶原的λDE3序列，
可表达 T7 RNA 聚合酶，因而适用于 pET 系列载体及其他 T7 启动子系列的载体。与 BLR(DE3)类
似（详见#CC96123），可稳定表达那些能够导致噬菌体 DE3 序列丢失的特定基因。此外，该菌株
携带利福m素抗性。经 pUC18 质粒转化检测，HMS174 (DE3)感受态细胞的转化效率可达 107 cfu/μg
DNA 以上。
产品组成
组分
HMS174 (DE3)
化学感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：FrecA1 hsdR (rK12- mK12+) (DE3) (Rif R)
存储条件
-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留；
化学法转化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min；
4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；
5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；
3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；
4. 为确保优良转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。
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