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详细介绍
产品简介
Origami 系列菌株是大肠杆菌 K12 的衍生菌，在 trxB 和 gor 基因上同时含有突变，这使得该菌株能
够更加高效地在胞内生成二硫键，有助于表达含二硫键的活性蛋白。该菌株含有 λDE3 序列，由
lacUV5 启动子驱动 T7 RNA 聚合酶的表达。Origami 系列菌株的感受态细胞具有卡那m素和四环s
抗性，能够用于氨苄抗性质粒的蛋白表达，尤其是和 pET32a 载体能够好搭配使用。pET32a 载体
含有 thioredoxin (TRX)融合标签，能够高效提升胞质内蛋白二硫键的形成。Origami 感受态细胞经
特殊工艺制作，经 pUC18 质粒检测，其转化效率>108 cfu/μg DNA。
产品组成
组分
Origami (DE3)
感受态细胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsLF [lac+ lacIq pro]
λ(DE3) gor522::Tn10 gorB (KanR, TetR)
存储条件
-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
质量控制
无外源质粒 DNA 残留；
化学法转化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；
3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；
4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；
5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。
注意事项
1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；
2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；
3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；
4. 为确保优良转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。
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