亚洲精品综合日韩中文字幕网站_精品综合久久久久97_中文在线天堂网www_久久精品免费一区二区三区_91久久国产综合精品女同国语_久久资源总站在线国产成人

产品展厅收藏该商铺

您好 登录 注册

当前位置:
上海语纯生物科技有限公司>>细胞>>感受态>>Ar.Qual Electro感受态

Ar.Qual Electro感受态

返回列表页
  • Ar.Qual Electro感受态

收藏
举报
参考价 面议
具体成交价以合同协议为准
  • 型号
  • 品牌 其他品牌
  • 厂商性质 生产商
  • 所在地 上海市

在线询价 收藏产品 加入对比 查看联系电话

更新时间:2023-04-28 07:59:14浏览次数:1016

联系我们时请说明是化工仪器网上看到的信息,谢谢!

产品简介

供货周期 现货 应用领域 生物产业
Ar.Qual Electro感受态

详细介绍

Ar.Qual Electro:                                                         50μl/支
pCAMBIA2301(control vector,10ng/μl ):                 10μl
保存条件(保质期):                                          -80℃(12个月)

 

基因型

Agrobacterium rhizogenes (strR,CamR ) Ar Qual Ri (agropine type)

 

 

 

产品说明

发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌,它能感染

大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。Ar.Qual发根农杆菌菌株含有农杆碱型Ri质粒,具有

广泛的宿主范围(玉米,烟草,番茄,柑橘等),同时具有链霉素,氯霉素抗性。唯地生物开的Ar.Qual发

根农杆菌电转感受态特别适用于大质粒的转化:经pCAMBIA2301质粒 (size:11633 bp)检测转化效率>10

cfu/μg DNA;经pCAMBIA2301-ZH质粒(size:40 kb)检测转化效率可达5×10cfu/μg DNA。

 

常规操作方法

1. 0.1 cm电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟,待其沥干水分,正置5分钟,使乙醇充分

挥发,待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖,冰中静置5分钟充分

降温。

 

2. 取-80℃保存的农杆菌感受态插入冰中5分钟,待其融化,加入0.01-1 μg质粒DNA(体积不大于6ul,好用

试剂盒抽提,双蒸水溶解;转化效率较高,一次使用前好做预实验确定所加质粒的量),用手打管底混匀

,立即插入冰中,用200 μl枪头将感受态-质?;旌衔锟焖僖频降缁鞅校巧媳?,空管保留待用。

3. 启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V(此参数为Biorad 推荐,使用者也可按所用电

转仪推荐的protocol操作),将电击杯从冰中拿出,吸水纸吸干外表面水份,快速放入电转槽中,启动电击,电

击完成快速插入冰中,加入1 ml无抗生素的TY,并转移到感受态空管中,28℃振荡培养2~3小时。

4. 6000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的TY平板上,倒置放于

28℃培养箱培养2-3天

 

 

● 农杆菌相关抗生素配方:

 

 抗生素

  配方

  原液

  工作液

 羧苄青霉素 (carb)

  双蒸水溶解,0.22 μm滤膜过滤除菌

 50 mg/ml

 50 μg/ml

 硫酸卡那霉素 (kan)

  双蒸水溶解,0.22 μm滤膜过滤除菌

 50 mg/ml

 50 μg/ml

 链霉素 (strep)

  双蒸水溶解,0.22 μm滤膜过滤除菌

 10 mg/ml

 50 μg/ml

 利福平 (rif)

 DMSO溶解,0.22 μm滤膜过滤除菌

 10 mg/ml

 20 μg/ml

 庆大霉素 (gent)

  双蒸水溶解,0.22 μm滤膜过滤除菌 

 20 mg/ml

 40 μg/ml

 氯霉素(cam

  无水乙醇溶解,0.22 μm滤膜过滤除菌

 34 mg/ml

 34 ug/ml

 

常用农杆菌抗性: (R:抗;S:敏感。)

农杆菌菌株

羧苄青霉素(carb)

链霉素(strep)

利福平(rif)

氯霉素(cam)

硫酸卡那霉素(kan)

 Ar A4

 S

 S

 S

 S

 R

 MSU440

 S

 R

 S

 S

 S

 Ar Qual

 S

 R

 S

 R

 S

 

● TY配方(1L):

Tryptone                5g

Yeast extract          3g

补水到1L体积,*溶解后,121度、20分钟高温灭菌

配制1M的氯化钙水溶液,121度、20分钟高温灭菌

每1L 灭菌的TY液体营养液中加入10ml 无菌的1M氯化钙水溶液即可。

若配制TY固体培养基,则加入15g 琼脂粉。

 

注意事项

1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

2. 电转感受态细胞中不可混入气泡,转化高浓度的质??上嘤跎僮钪沼糜谕堪宓木俊?/span>

3. 平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量或最终用于涂板的菌量。

4.  Ar.Qual具有链霉素、氯霉素抗性,不可用于具有链霉素抗性或氯霉素抗性质粒的转化

收藏该商铺

登录 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我们将在第一时间回复您~

对比框

产品对比 产品对比 联系电话 二维码 意见反馈

扫一扫访问手机商铺
在线留言
连城县| 上饶县| 长沙市| 九台市| 钦州市| 玉田县| 称多县| 永城市| 罗平县| 疏附县| 饶平县| 武清区| 天峻县| 哈尔滨市| 宜黄县| 额尔古纳市| 安丘市| 唐河县| 堆龙德庆县| 酒泉市| 吉安县| 中江县| 宝兴县| 兴国县| 秭归县| 卢龙县| 尖扎县| 丰城市| 土默特左旗| 泽库县| 封开县| 泰来县| 渭南市| 军事| 林周县| 达孜县| 色达县| 廉江市| 青州市| 古田县| 泸水县|