Mach1-T1:                                                       100μl/支

pUC19 (control vector，10pg/μl):                         10μl

保存条件(保质期)：                                 -80℃（6个月）

基因型

F^- φ80(lacZ)ΔM15 ΔlacX74 hsdR(r_K^- m_K⁺) ΔrecA1398 endA1 tonA

产品说明

Mach1-T1菌株由野生型non-K-12 E. Coli W菌株改造而来，是目前生长速度较快的感受态细胞之一，在平板上 8h可见克隆，缺失核酸内切酶(endA)，提高了质粒DNA的产量和质量；重组酶缺陷型(recA1398)减少插入片段的同源重组概率，保证了插入DNA的稳定性；lacZΔM15的存在使Mach1-T1可用于蓝、白斑筛选；tonA突变赋予Mach1-T1菌株对噬菌体T1和T5的抗性。Mach1-T1感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>10⁹cfu/μg DNA。

操作方法

1. Mach1-T1感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质?；蛄硬? 并用手打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

3.向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。

4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少13小时。

注意事项

1. 感受态细胞好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。

2. 混入质?；蛄硬锸庇η崛岵僮鳌?/span>

3. 转化高浓度的质?；蚋咝实牧硬锟上嘤跎僦沼糜谕堪宓木俊?/span>