OP10：                                                     100μl/支

pUC19 (control vector，10pg/μl):                   10μl

保存条件(保质期)：                            -80℃（6个月） 

基因型

F^- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 araΔ139 Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL (Str^R) endA1 nupG 

产品说明

*0菌株来源于MC1061菌株，是目前实验室常用的感受态细胞之一，基因型与DH10B高度类似 (DH10B为galE15型，而*0为galU型)。*0生长速度快 (比DH5α快，但比Mach1-T1生长速度慢)，10小时可见克隆，recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取?？捎糜诠菇寺?，蓝白斑筛选等实验。*0感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率>5×10⁸cfu/μg DNA。 

操作方法

1. *0感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA (质粒或连接产物) 并用手打EP管底轻轻混匀 (避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少13 h。

注意事项

1. 感受态细好在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。

2. 混入质?；蛄硬锸庇η崛岵僮?。

3. 转化高浓度的质?；蚋咝实牧硬锟上嘤跎僦沼糜谕堪宓木?。