详细介绍
HEPES液(1M)
Hepes缓冲液的主要成分是(2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]ethanesulfonic acid),HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力。其优点是在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的PH值.在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。
大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂,酸性培养液呈橙黄色,碱性培养液呈深红色.HEPES有些昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒. 原则上,hepes缓冲液可用来代替碳酸氢盐,以解除需要高浓度CO2培养环境的限制.实际操作中并非如此简单。溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长也是很重要的。
HEPES液(1M)
含238.3g/L HEPES。2-8℃保存
至于选择何种培养基并没有一定的标准,有几点建议可供参考:
(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基??梢圆樵牟慰嘉南祝蛟诠郝蛳赴晔弊裳?。也可以在一些生物公司的网站上搜索,如Invitrogen网站上有一个Cell Line Database的工具,选择你感兴趣的细胞类型,它就会弹出推荐的培养基、血清和转染试剂等,有时还有优化好的转染步骤,很方便。
(2) 其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。
(3) 根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选RPMI1640 。
(4) 用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择培养基,这是客观的方法,但比较繁琐。