本网站销售的化学产品仅供科学研究或工业应用，不直接用于食品、药品、临床或动物的诊断或治疗！

产品名称：小鼠羊膜成纤维细胞

组织来源：羊膜

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

培养信息：

培养基：含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传3代左右

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

小鼠羊膜成纤维体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

细胞简介：

小鼠羊膜成纤维分离自胎盘组织；胎盘（placenta）是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官，由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育，依靠胎盘从母体取得营养，而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素，是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代，胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合，以达到母子间物质的交换，这样的结构称假胎盘。羊膜是胎盘的内层，与眼结膜组织结构相似，含有眼表上皮细胞，包括结膜细胞和角膜上皮细胞生长所需要的物质，其光滑，无血管、神经及淋巴，具有一定的弹性；在电镜下，其分为五层：上皮层、基底膜、致密层、纤维母细胞层和海绵层，羊膜基底膜和羊膜羊膜基质层含有大量不同的胶元，主要为Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型胶原和纤维粘连蛋白、层粘连蛋白等成份。羊膜成纤维细胞主要来自基底膜、致密层、纤维母细胞层。

方法简介：

实验室分离的小鼠羊膜成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

实验室分离的小鼠羊膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养步骤：

一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

二、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a）、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

b）、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃上清液，补加1-2ml培养液后吹匀，将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。

收到细胞如何处理？

1、首先，观察细胞培养瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有，请拍照，并及时与技术支持联系（所拍照片将作为后续服务依据）。

2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落；先不要打开培养瓶盖，将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时，以便稳定细胞状态。

3、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如贴壁特性（贴壁/悬?。?、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。

4、静置完成后，取出细胞培养瓶，镜检、拍照，记录细胞状态（所拍照片将作为后续服务依据）；建议细胞传代培养后，定期拍照、记录细胞生长状态。

5、贴壁细胞：若细胞生长密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，移除细胞培养瓶内培养基，预留5ml左右继续培养，直至细胞密度达80%左右再进行传代操作，瓶盖可稍微拧松。

6、悬浮细胞：将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内，1200rpm离心5min，离心后上清培养基可收集备用，管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时，若细胞密度超过80%，可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养，补加培养基至5ml；若细胞密度未超过80%，将细胞悬液移至原瓶继续培养，直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作

公司正在出售的产品：

植物钙调素试剂盒   植物钙调素试剂盒      植物钙调素试剂盒，，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：植物钙调素试剂盒、植物钙调素试剂盒

γ-谷酰转肽酶活性试剂盒   γ-谷酰转肽酶活性试剂盒      γ-谷酰转肽酶活性试剂盒，，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：γ-谷酰转肽酶活性试剂盒、γ-谷酰转肽酶活性试剂盒

植物D3试剂盒   植物D3试剂盒      植物D3试剂盒，，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：植物D3试剂盒、植物D3 试剂盒

人1,3-二0酸甘油酸试剂盒   人1,3-二0酸甘油酸试剂盒      人1,3-二0酸甘油酸试剂盒，，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：人1,3-二0酸甘油酸试剂盒、人1,3-二0酸甘油酸试剂盒

白细胞介素19抗体

麦芽糖结合蛋白抗体

PROM1重组大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 蛋白 (His 标签) Protein

Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse 0.5mgDefensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) 防御素β2抗原(小鼠)

APP重组人 Beta-amyloid 42 / Beta-APP42 蛋白 (His & GST 标签) Protein

ADCYAP1R1 Protein Human 重组人 ADCYAP僀?僀

Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse 0.5mgDefensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) 防御素β2抗原(小鼠)

ADCYAP1R1 Protein Human 重组人 ADCYAP1R1 蛋白

PROM1重组大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 蛋白 (His 标签) Protein

CD200R4 Protein Mouse 重组小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 蛋白

APP重组人 Beta-amyloid 42 / Beta-APP42 蛋白 (His & GST 标签) Protein

植物细胞分裂素(Cytokinin)试剂盒

Human ai liver kidney microsomal aibody (LKM) ELISA Kit 人抗肝肾微粒体抗体(LKM)试剂盒

Porcinebrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 猪脑素/脑尿肽(BNP)试剂盒分装

CLIAKitforAFP-L2(Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin2)ELISAKit人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2

血液A含量荧光定量试剂盒20次

MouseThyroglobulin,TGELISAKit小鼠甲状腺球蛋白(TG)试剂盒

小鼠羊膜成纤维细胞人组织型纤维溶酶激活物(t-PA)试剂盒

Rat apolipoprotein E (Apo-E) ELISA Kit 大鼠载脂蛋白E(Apo-E)试剂盒

Humanai-toxoplasmaIgMaibody,ai-toxIgMELISAKit 人抗弓形体IgM抗体(ai-toxIgM)试剂盒分装

HumanHeatShockProtein90,HSP-90试剂盒人热休克蛋白90(HSP-90)试剂盒

组织副氏菌B(SalmonellaParatyphiB)定量PCR扩增试剂盒20次

HumanMaixmetalloproteinase13,MMP-13ELISAKit人基质金属蛋白酶13(MMP-13)试剂盒