测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
 2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴 
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤 
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板 
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。

试剂和样本的控制方法：
一、试剂
1.试剂的选择：国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关，我司严格按照进行，已获得国家承认的“三证”，每一个产品都有对应的批号，只要客户提前下单，我们就能为您提供新批次的产品，不必担心会有过期的试剂。我司的试剂，值得您选择。
2.试剂的准备：先将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20-30 min后，再进行测定，使试剂盒在使用前与室温平衡，这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度，以满足后面的测定需求。
二、样本
1.内源性干扰因素：包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等；
类风湿因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理；
③检测抗原时，可用加入到标本稀释液中使RF降解；
补体的控制方法：
①用EDTA稀释标本；
②56℃ 30 min加热血清使C1q灭活；
2.外源性干扰因素：包括标本溶血、细菌污染、保存时间过长或凝固不全等；
控制方法：采血时规范操作，采集的血液勿用力震荡，以防溶血；收集标本时采用无菌试管，经检测后再低温冻存；保存时间不宜过久，检测时尽量采用新鲜标本；对于凝固不全的血标本可适当加入抗凝剂，并放入37℃水中1 h，待充分凝固后再离心分离血清。

操作步骤:

1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9）在450nm波长处测定各孔的OD值。

具有如下优点：
一、高效、灵敏、特异的抗体；
二、稳定的重复性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；
五、性价比非常好，节省实验经费。

ADP(Adenosinediphosphate)ELISAKit人二腺苷CAS:822409进口、国产规格：25mg

PG(Proteoglycan)ELISAKit人蛋白聚糖CAS:569进口、国产规格：500mg

PYD(Pyridinoline)ELISAKit人CAS:5326进口、国产规格：1g

5-HIAA(5-hydroxyindolaceticacid)ELISAKit人5羟基吲哚CAS:1071进口、国产规格：125mg

12-HETE(20-hydroxyeicosatetraenoicacid)ELISAKit人12羟二十四CAS:1367进口、国产规格：200mg

Hyp(hydroxyproline)ELISAKit人羟脯氨CAS:710进口、国产规格：200mg

NO(nitricoxide)ELISAKit人一CAS:562进口、国产规格：250mg

ENA8/CXCL5(Epithelialneutrophilactivatingpeptide78)ELISAKit人上皮中性粒细胞活肽78CAS:516进口、国产规格：200mg

VC(VitaminC)ELISAKit人维生素CCAS:809进口、国产规格：250mg

VB6(VitaminB6)ELISAKit人维生素B6CAS:90037进口、国产规格：3strips

sP-selectin(solubleP-selectin)ELISAKit人可溶性P选择素CAS:1186进口、国产规格：500mg

TIMP(tissueinhibitorsofmetalloproteinase1)ELISAKit人基质金属蛋白酶抑制子1CAS:3040进口、国产规格：200mg

VD(VitaminD)ELISAKit人维生素DCAS:1188进口、国产规格：10mg

VK1(VitaminK1)ELISAKit人维生素K1CAS:583进口、国产规格：200mg

VB12(VitaminB12)ELISAKit人维生素B12CAS:1359进口、国产规格：200mg
TNFsR-Ⅰ elisa试剂盒苏式-1-C-香酚基三Quest Fluo-8™, AM  cellobiase微晶纤维素酶检测试盒

橙素Quest Fluo-8™, sodium salt CMCase纤维二糖酶检测试盒

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中国台湾三尖杉Quest Fluo-8L™, AM  Theileriidae-Ab纤维二糖酶检测试盒