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技術(shù)文章

熒光PCR凍干-吐溫

閱讀:2374          發(fā)布時(shí)間:2020-7-25

吐溫溶于水,容易分散。按結(jié)構(gòu)式中R不同,分為吐溫20 吐溫40、吐溫80和吐溫85等種類。由司班分子中 殘余的羥基與氧化乙烯縮合而成。主要用作乳化劑,色層分析固定液。吐溫的應(yīng)用例如吐溫80在水、乙醇、甲醇或醋酸乙酯中易溶,在礦物油中極微溶解。應(yīng)用于注射液及口服液的增溶劑或乳化劑;膠囊劑用分散劑;軟膏劑用乳化劑和基質(zhì),栓劑用基質(zhì)等。例如吐溫20在實(shí)時(shí)熒光PCR反應(yīng)緩沖液的應(yīng)用,反應(yīng)緩沖液包括這些原料如三羥甲基氨基甲烷?鹽酸緩沖液、氯化鎂、硫酸銨、二甲基亞砜、脫氧核糖核苷三磷酸、甘油、牛血清蛋白、吐溫20、三氮化鈉、Rox參比染料、去離子水等。該緩沖液提高了PCR反應(yīng)效率,適用于PCR技術(shù)的高效擴(kuò)增型和靈敏檢測(cè),具有穩(wěn)定性好,熒光效果佳、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)。熒光PCR輔料篩選要點(diǎn):1.不影響擴(kuò)增和反應(yīng)。2.選擇合適的保護(hù)劑聯(lián)用方式。3.注意保護(hù)劑密度范圍。

 

 

 

Pilot3-6T應(yīng)用示例(熒光PCR凍干):

  1. 探針、底物、引物原料要求確定。
  2. 凍干溶液配方開發(fā),采用正交法或響應(yīng)曲面法進(jìn)行輔料篩選。
  3. 選擇適合的包材和模具。
  4. 設(shè)計(jì)凍干曲線配合輔料篩選。
  5. 確定配方及工藝。
  6. 穩(wěn)定性測(cè)試。
  7. 根據(jù)穩(wěn)定性測(cè)試結(jié)果修正工藝或配方。
  8. 整個(gè)環(huán)節(jié)注意環(huán)境、設(shè)備、人員的結(jié)合。

 

 

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