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一、蘇木精—伊紅染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)介紹

蘇木精—伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining)，簡稱HE染色法，石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。蘇木精染液為堿性，主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色；伊紅為酸性染料，主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。

二、蘇木精—伊紅染色實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理

易于被堿性或酸性染料著色的性質(zhì)分別被稱為嗜堿性和嗜酸性，而對堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱為中性。細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細(xì)胞核的染色質(zhì)、腺細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色，這些物質(zhì)稱為嗜堿性。而細(xì)胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細(xì)胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細(xì)胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色，這些物質(zhì)稱為嗜酸型。脫氧核糖核酸（DNA）兩條鏈上的磷酸基向外，帶負(fù)電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色，所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料，在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，與蛋白質(zhì)的氨基正電荷的陽離子結(jié)合使胞漿染色，細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌肉、結(jié)締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色或粉紅色，與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明對比。

三、實(shí)驗(yàn)流程

1.將脫蠟至水的切片放入蘇木精水溶液中染色數(shù)分鐘。

2.酸水及氨水中分色，各數(shù)秒鐘。

3.流水沖洗1 h后入蒸餾水片刻。

4.70%和90%酒精中脫水各10 min。

5.酒精伊紅染色液染色2-3 min。

6.染色后的切片經(jīng)純酒精脫水，再經(jīng)二甲苯使切片透明。

7.將已透明的切片滴上加拿大樹膠，蓋上蓋玻片封固。