透明质酸钠测定

透明质酸钠(hyaluronicacid，简称ha)又名玻尿酸，是人体组织中保持水分最重要的物质，透明质酸是皮肤固有的天然生物分子,分子量较小的透明质酸可渗入皮肤表皮层,促进营养的供给和废物的排泄,从而防止皮肤老化,起到美容和养颜的作用。

 本次根据透明质酸钠饮品测定标准T/CNFIA155-2022 ,为一种含透明质酸钠的固体饮料及其中透明质酸钠含量检测方法。

一、样品制备

1.样品前处理

 取样品适量(相当于透明质酸钠10mg),置于烧杯中,加入3mL~5mL磷酸盐缓冲液，混匀。用0.1 mol/L 氢氧化钠溶液或0.1mol/L盐酸溶液调节pH值至6.0后,用磷酸盐缓冲液转移并定容至10 mL容量瓶中，混匀。

2.酶解

 准确移取 0.50 mL上述处理后的样品溶液至10mL离心管中,补加磷酸盐缓冲液至5mL,再加入1 mL透明质酸酶溶液,混匀,42℃水浴中酶解2h。沸水浴2min,终止反应。冷却至室温后,将上述酶解液转移至10mL容量瓶中,用磷酸盐缓冲液定容并摇匀。经0.22μm水相滤膜过滤后供高效液相色谱测定。

二、色谱柱选择

色谱柱：Morphling Sugar-H   7.8*300mm   8μm

检测波长：232nm

柱温：40℃

流动相：1%磷酸水溶液

流速：0.6ml/min

进样量：20μl

三、色谱图