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蘇州千舍生物科技有限公司

NCI-H2228 人肺癌細(xì)胞培養(yǎng)手冊

時(shí)間:2025-3-13閱讀:254
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細(xì)胞名稱:NCI-H2228 人肺癌細(xì)胞

貨號:WS60239STR鑒定)

規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

細(xì)胞介紹

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,患者不吸煙。細(xì)胞生長速度慢,傳代一次時(shí)間為10-15天。每個(gè)批次均通過本庫支原體檢測,結(jié)果為陰性。在我?guī)焱ㄟ^STR檢測無誤。

STR鑒定結(jié)果為:Amelogenin: X; CSF1PO: 12; D13S317: 11; D16S539: 11,13; D5S818: 12; D7S820: 11; THO1: 7,8; TPOX: 11; vWA: 15,17。

一、細(xì)胞特性

1) 來源:人 肺

2) 形態(tài):上皮樣,貼壁細(xì)胞

3) 含量:>1x10^6 細(xì)胞數(shù)

4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。 

、運(yùn)輸和保存 

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞 

1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。 

2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。 

、培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備 

STR鑒定結(jié)果:

Amelogenim:X  Y

D5S818:9,11

D13S317:8,11

D7S820:8,12

D16S539:9,13

vWA:15,17

THO1:9.3,13

TPOX:8,18

CSF1PO:12,13

H1細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)人胚胎干細(xì)胞

1.試劑和材料

H1細(xì)胞培養(yǎng)基試劑盒

成分

規(guī)格

數(shù)量

儲(chǔ)存條件

H1細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

500mL

1瓶

2-8℃

H1細(xì)胞培養(yǎng)基添加劑

20mL

1支

-20℃

、傳代方法

收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(最好是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長情況。

(一)如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

(二)如果細(xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。

2. 加0.7-1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,用力拍打瓶壁,期間每隔 5-10s放到顯微鏡下觀察,直至50-70%的細(xì)胞脫落后,加入2ml 以上培養(yǎng)基中止消化。

3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,收到細(xì)胞后的第一次傳代一般是一傳二。

注:

1、觀察細(xì)胞最好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請?jiān)?0X或20X物鏡下。

2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。

4、收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請及時(shí)與我們聯(lián)系。


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