融合mRNA 現(xiàn)貨

融合mRNA 現(xiàn)貨

應用領域

• mRNA翻譯和降解研究
• 蛋白質(zhì)生物化學研究：合成，折疊，加工，穩(wěn)定性，定位，降解
• mRNA轉(zhuǎn)移到原代細胞中而不產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因生物（GMO）
• 僅RNA的CRISPR / Cas技術進行基因組工程

技術特點

• 不依賴脂質(zhì)轉(zhuǎn)染的mRNA轉(zhuǎn)移到活細胞中
• mRNA轉(zhuǎn)移在5-20分鐘內(nèi)完成
• 沒有內(nèi)吞作用
• 無需溶酶體降解
• 沒有基因轉(zhuǎn)移到細胞核
• 優(yōu)化用于功能性封端和聚腺苷酸mRNA轉(zhuǎn)移的協(xié)議
• 無需1級或2級生物安全實驗室
• 優(yōu)異的生物相容性，細胞毒性低

技術指標

套件組件

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在此處以PDF格式下載整個“轉(zhuǎn)染”應用指南。

選擇指南：何時使用Fuse-It-mRNA easy或Fuse-It-mRNA？

*產(chǎn)品使用不同的化學配方。轉(zhuǎn)染效率取決于細胞類型和進一步優(yōu)化。

與Fuse-It-mRNA的膜融合與脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染

Fuse-It-mRNA即使在原代細胞中也能高效合成蛋白質(zhì)。

Fuse-It-mRNA囊泡充滿eGFP-mRNA，并與正常人表皮角質(zhì)形成細胞（nHEK）融合10分鐘。eGFP-mRNA轉(zhuǎn)移后兩個半小時，50％的細胞表達eGFP，八小時后幾乎100％的細胞表達eGFP。

膜融合-蛋白表達的直接方法

立即mRNA遞送

包含mRNA的Fuse-It脂質(zhì)體載體僅與細胞膜融合，然后將mRNA直接釋放到細胞質(zhì)中。mRNA翻譯立即開始，而不會干擾內(nèi)吞作用，溶酶體降解或有絲分裂。與傳統(tǒng)的基于脂質(zhì)復合物的遞送方法不同，細胞不會通過胞吞作用使mRNA內(nèi)在化。

融合mRNA

基于脂質(zhì)復合體的DNA轉(zhuǎn)染

Fuse-It-mRNA導*其快速的mRNA表達。通過CHO-K1細胞與Fuse-It-mRNA的膜融合轉(zhuǎn)移eGFP-mRNA后六小時，近100％的細胞表達eGFP，而質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后表達eGFP的細胞數(shù)量低于10％。

高效，即使在原電池中

基于天然細胞膜的電荷，F(xiàn)use-It-mRNA脂質(zhì)體能夠與大多數(shù)細胞類型有效融合。細胞系，非增殖細胞（例如神經(jīng)元）和廣譜難以轉(zhuǎn)染的原代細胞可以直接翻譯細胞質(zhì)中的mRNA。膜與Fuse-It-mRNA融合可實現(xiàn)快速高效的蛋白表達，而沒有基因組整合的風險。

易于處理

Fuse-It-mRNA方案易于使用，因為融合試劑和mRNA之間的比率在每個實驗中均保持恒定。該試劑可以不受限制地使用，因為不會產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因生物。

極低的細胞毒性

與傳統(tǒng)的基于lipoplex的方法相比，F(xiàn)use-It-mRNA僅需要短暫的孵育時間-5至20分鐘即可獲得大的核苷酸轉(zhuǎn)移速率。此外，少量的脂質(zhì)體脂質(zhì)可導致大的mRNA轉(zhuǎn)移，而無需化合物釋放內(nèi)體。此功能可保護敏感細胞免受載體試劑的潛在毒性影響。

融合mRNA

基于脂質(zhì)復合體的mRNA轉(zhuǎn)染

與傳統(tǒng)的基于lipoplex的方法相比，F(xiàn)use-It-mRNA融合不會傷害細胞。在通過原代人上皮細胞（nHEK）與Fuse-It-mRNA膜融合將eGFP-mRNA轉(zhuǎn)移后的16小時，細胞的活力很高，而用基于經(jīng)典lipoplex的方法處理的細胞發(fā)生了明顯的細胞死亡。

使用Fuse-It-mRNA在CHO-K1細胞中轉(zhuǎn)移eGFP-mRNA后的蛋白質(zhì)合成：

在開始實驗的2小時內(nèi)，細胞中已檢測到eGFP。eGFP的量增加并保持穩(wěn)定超過3天（90小時）。

注意：使用功能上加帽的和聚腺苷酸化的mRNA將獲得結(jié)果。

Fuse-It-mRNA處理后各種細胞類型中mRNA表達的效率

* mRNA的表達效率可能會有所不同，這取決于進一步的實驗因素（例如，培養(yǎng)基，細胞適應性，傳代數(shù)和方案優(yōu)化）。

原代細胞

干細胞

細胞系

 注：楊清辰發(fā)布