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基因提取科研實驗技術服務介紹

閱讀:97          發(fā)布時間:2024-9-20
基因提取


應用簡介
       DNA是遺傳信息的載體,是最重要的生物信息分子,是分子生物學研究的主要對象,因此DNA取方面的工作,那就根本談不上進行分子生物學方面的實驗。
在DNA提取過程中應做到:1、根據(jù)不同研究需要,保證結構的相應完整性;2、盡量排除其它大分子成分的污染(蛋白質、多糖及RNA等);3、保證提取樣品中不含對酶有抑制作用的有機溶劑及高濃度的金屬離子。下面結合不同的研究對象列出幾種相應的DNA提取方法。
技術原理
       原核生物的基因是連續(xù)不間隔的,直接用限制酶從DNA切取就可得到目的基因,再PCR擴增后就能得到大量目的基因。
真核細胞核基因組DNA編碼的基因,以及感染真核細胞的DNA病毒和反轉錄病毒基因組編碼基因,統(tǒng)稱真核基因。真核基因調(diào)取是指通以動物組織或細胞為模板,提取獲得cDNA或gDNA,從中擴增基因或啟動子等功能元件。也可將基因片段或者各功能元件片段亞克隆至各載體。
實驗方法
       1、原核流程

       2、真核流程
 
      送樣注意事宜

       1、DNA樣品保存在TEbuffer或超純水中,并置于1.5mL或2.0mL的滅菌不黏管內(nèi),并用封口膜封好。管上用記號筆或標簽清晰、準確地標記樣品名稱。
       2、為確保實驗的順利,建議樣品備份1~2份,避免部分樣品降解導致重新取材、制備或送樣,耽誤時間。
       3、所有樣品必須附帶一份《樣品信息單》,詳細填寫信息單上所要求的各項樣品信息,包括樣品編號、樣品狀態(tài)(DNA液體、干粉或組織葉片、血液、肌肉等)、是否可以用完,如果是DNA液體,還需標注濃度、體積、制備時間、電泳圖等,隨同樣品一起寄出,并將電子版發(fā)送至銷售人員郵箱。
       4、盡量使用干冰運輸,夏季運輸需要適當增加用量;


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