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上海精瑞科学仪器有限公司

BIA Separations 关于蛋白纯化的问题

时间:2020-3-26阅读:1095
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           三国时代,诸侯争霸,群雄逐鹿

                               周瑜更是风度翩翩、文武双全,

                                 全江东公瑾女孩的老公,
 


                     



                                     只可惜,到底诸葛孔明略胜*,

                                         公瑾终饮恨江东。



 

                                         pDNA的纯化方案已经日渐成熟,

                                       常规方法亦可以满足目前的需求,

                                         奈何,偏偏又冲出一匹黑马,

                              以“省时、省力、省钱”获得业内人士交口称赞



 

                                              虽然常规方法还算出色,

                               但依然不禁让人发出“既生瑜何生亮”之叹。

 

                               话说这位洋“孔明”,生于一户洋人家族:

                                              BIA Separations,

                                             更有一个洋气的名字:

                                         BIA•整体柱•pDNA纯化方案



                              对决:今天小编就带大家来看一场高手之间的



 

                                                     周瑜-常规方法 

                                                   VS 

                       诸葛孔明-BIA•整体柱•pDNA纯化方案
 

 

 周瑜-常规方法诸葛亮-BIA整体柱纯化整体柱纯化方案的优势
纯化步骤及流程对比
步骤三步法两步法þ 步骤少
þ 裂解流程更加符合药品的生产标准
þ 纯化后的质粒纯度一样
þ 减少了分子筛的需求
þ 省时、省力、省钱
优化的前期处理必须要用中空纤维柱浓缩样品碱裂解法,CaCl2沉淀蛋白质和RNA
 分子筛:去除RNA,同时将缓冲液置换为疏水柱缓冲液 
第二步疏水柱:分离开环DNADEAE离子柱:分离去除RNA,杂蛋白,内毒素等
第三步离子柱:分离杂蛋白,内毒素等C4柱:分离开环DNA
纯化成本对比 (以200mg小规模为例)
所需耗材10L分子筛80ml套装柱þ 总体成本可降低50%
þ 规模越大,成本降低越多
þ GMP级别的接头,更符合GMP标准

þ 轻松放大,避免了装填验证带来的烦恼
100ml疏水柱 
100ml离子柱 
GMP接头1L以下的层析没有GMP级别的接头,不符合GMP的标准。从8ml开配有GMP级别的接头
纯化效果 (相同的纯化体积,相同的洗脱方法,相同上样体积)
  DEAE离子柱纯化的效果,质粒的纯度已经达到90%以上不言而喻
疏水柱常规疏水柱回收率和纯度不如BIA的C4整体疏水柱C4整体疏水柱的回收率和纯度要高于常规疏水柱

 

                                            

                                      各位做过pDNA纯化的老铁们,

                                                 说句心底话,

                                              全面碾压有木有?

                               大写的“省时、省力、省钱有木有?

                                              话不多说,继续上图





                               BIA 整体柱两步法质粒纯化工艺流程总览






 

                                      各位做过pDNA纯化的老铁们,

                                         图看懂了吗?


                         

 

                                        至于常规方法的效率,

                                           是不是配得上

                        它将近二倍于BIA整体柱纯化方案的价格,

                                          我就说两句话:


 

                                                      

                                             一分钱一分货,

                                             三分钱五分货,

                                             五分钱十分货;

                                       

                                    BIA的纯化结果已经证明了,

                                      一张整票胜过一把零钱,

                                      一个整体柱搞定一切……

                                    

 

                                                后的后,

                                              要感谢一个人,

                                    那位pNDA纯化大神小哥哥,

                                       无私地贡献出对比数据,

                                  才有了今天精彩的*打架!

                                          请收下小编的膝盖

                                   

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