多肽合成步骤
1、树脂的选择及氨基酸的固定
用于多肽合成的高分子的载体主要有3类:交联聚苯乙烯;聚酰胺;聚乙烯乙二醇脂类树脂。氨基酸的固定主要是通过?;さ陌被岬聂然髦姆从胖湫纬晒布奂词迪帧?br />
2、氨基、羧基、侧链的保护及脱除
要成功合成具有特定的氨基酸顺序的多肽,需要对暂不参与形成酰胺键的氨基和羧基加以?;?,同时对氨基酸侧链上的活性基团也要保护,反应完成后再将?;せ懦?。
近年来,FMOC合成法得到了广泛的应用。羧基通常用形成酯基的方法进行?;?,甲酯和乙酯是逐步合成中?;然某S梅椒ā?br />
3、成肽反应
固相中的成肽反应一般是将两个相应的氨基被保护的氨基酸,及羧基被?;さ陌被岱旁谌芤耗诓⒉恍纬呻募?,要形成酰胺键,经常用的手段是将羧基活化,变成混合酸酐、活泼酯、酰氯或用强的缩合剂(如碳二亚氨)形成对称酸酐等方法来形成酰胺键。
4、裂解及合成肽链的纯化
BOC法用TFA+HF裂解和脱侧链?;せ現MOC法直接用TFA,有时根据条件不同,其它碱、光解、氟离子和氢解等脱?;し椒ㄒ脖徊捎谩:铣呻牧唇徊降木?、分离与纯化通常采用高效液相色谱、亲和层析、毛细管电泳等。
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