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HPLC液相色譜柱的尺寸選擇
閱讀：3356 發(fā)布時間：2020-1-14
HPLC液相色譜柱采用特殊的鍵合工藝，雙封尾，鍵合密度大，碳含量高，疏水性較高(極性低)，適用于各類非極性化合物分析，在酸或堿性流動相下都有很好的分離效果。
HPLC液相色譜柱的尺寸選擇：
較長的色譜柱組分保留較強(qiáng)，運(yùn)行時間較長，柱效更高，分離度效果更好。在實(shí)際工作中應(yīng)綜合衡量運(yùn)行時間和柱效，選擇長度適宜的色譜柱。例如含量測定、溶出檢測對于分離的要求較低，可選用較短的色譜柱，減少運(yùn)行時間；有關(guān)物質(zhì)一般選擇較長的色譜柱，提高分離效果。
內(nèi)徑小的色譜柱靈敏度較高，峰型更窄，但是載樣量較小。如果載樣量滿足要求，需要更高更尖銳的峰提高靈敏度，可以選擇更小內(nèi)徑。但是如果進(jìn)樣量超過了柱載樣量，色譜峰將極大變寬。所以應(yīng)在靈敏度和載樣量之間綜合衡量。
粒徑小的色譜柱分離度較好，色譜柱壓力更大。如果5μm粒徑的色譜柱分離度稍有不足，則同型號3μm色譜柱的分離度一般會提供令人滿意的選擇性。
如果選擇較小尺寸的色譜柱，應(yīng)衡量柱外死體積對柱效的影響，柱外死體積包括連接管線、進(jìn)樣體積、色譜柱接頭與色譜柱連接處的空隙等。所以一般超高效液相使用的色譜柱不適用于常規(guī)液相儀。小規(guī)格色譜柱使用同一品牌的儀器，減少連接處空隙引入的死體積。