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上海牧榮生物科技有限公司

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如何克服色譜溶劑檢測干擾?

閱讀:979      發(fā)布時間:2023-12-12
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快速色譜法是純化反應(yīng)混合物和天然產(chǎn)物提取物的重要工具?,F(xiàn)代快速色譜儀器配備了紫外檢測器來觀察洗脫的化合物并觸發(fā)其收集。然而,用于分離各種混合物成分的溶劑有時會掩蓋或降低其可檢測性,從而降低其純度和回收率。

那么,你可以做些什么來緩解這個問題呢?

那么,您可以嘗試一些選擇,包括更換溶劑(例如,將乙酸乙酯改為丙酮或 MTBE)或使用能夠?qū)崟r消除溶劑紫外線吸收(又稱基線校正)的閃蒸系統(tǒng)。兩者都有各自的優(yōu)點,但本文重點討論基線校正。

Biotage® Selekt 等 Flash 系統(tǒng)提供實時基線校正。該功能消除了運行過程中溶劑造成的任何紫外線吸收,從而使紫外線吸收溶劑無法檢測到的化合物變得對檢測器可見。

例如,靛紅酸酐和芐胺的反應(yīng)產(chǎn)生了所需的產(chǎn)物和一些副產(chǎn)物。使用 5 克硅膠柱 (Biotage® Sf?r HC) 和庚烷/乙酸乙酯梯度進(jìn)行快速色譜法僅檢測產(chǎn)品,因為基線隨著乙酸乙酯梯度的增加而上升,圖 1。

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圖 1.使用庚烷/乙酸乙酯梯度純化反應(yīng)混合物,并使用 UV 檢測,無需基線校正,隱藏了粗反應(yīng)混合物中的副產(chǎn)物。

為了可視化反應(yīng)中產(chǎn)生的副產(chǎn)物,啟用系統(tǒng)基線校正功能(通常是默認(rèn)方法參數(shù))的純化消除了這個問題,圖 2。

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圖 2.啟用基線校正的反應(yīng)混合物純化揭示了隱藏的副產(chǎn)物。

因此,如果紫外線基線上升導(dǎo)致您出現(xiàn)檢測問題,請考慮具有基線校正功能的閃光系統(tǒng)。



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