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重组肝炎肝素酶III蛋白，CF

6145-GH

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重组肝素肝素酶III蛋白，CF摘要

1纯度  

> 95％，通过在还原条件下进行SDS-PAGE并通过胶体考马斯蓝染色以每泳道5μg的方式观察。

2内毒素水平

通过LAL方法，每1μg蛋白质<1.0 EU。

3活动

通过其从肝素中释放寡糖的能力来衡量。在所述条件下测得的比活度＞ 3,000pmol / min /μg。

4资源

大肠杆菌来源的p。肝素肝素酶III蛋白
Gln25-Pro659，具有N-末端Met和6-His标签

5登记号 AAB18278

6 N端序列分析 大都会

7预测分子量 74 kDa

8 SDS页面66 kDa，还原条件

产品数据表

无载体

CF是什么意思？

CF代表无载体（CF）。我们通常将牛血清白蛋白（BSA）作为载体蛋白添加到我们的重组蛋白中。添加载体蛋白可增强蛋白稳定性，延长保质期，并使重组蛋白以更稀的浓度存储。运营商免费版不包含BSA。

什么配方适合我？

通常，我们建议购买带有BSA的重组蛋白，用于细胞或组织培养，或作为ELISA标准。相反，建议将无载体蛋白质用于BSA的存在可能会干扰的应用。

6145-GH

测定步骤

用料

• 分析缓冲液：50 mM Tris，2 mM CaCl ₂，pH 7.5
• 重组P. heparinus肝素酶III（R P. heparinus肝素酶III）（目录号＃6145-GH）
• 底物：肝素（Tocris，目录号2812），去离子水中储备20 mg / mL
• 96孔透明的紫外线透明微孔板（Corning，目录号3635）
• 酶标仪（型号：Molecular Devices的SpectraMax Plus）或同等产品

1. 稀? P. heparinus肝素酶III0.5纳克/μL在测定缓冲液。
2. 在测定缓冲液中将底物稀释1.5 mg / mL。
3. 负荷成板100μL稀释的为r的P. heparinus肝素酶III，并开始加入的1.5毫克/毫升基板200μL反应。包括一个包含100 µL测定缓冲液和200 µL 1.5 mg / mL底物的底物空白。
4. 在动力学模式下以232 nm的吸光度读数5分钟。
5. 计算比活动：

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*针对基板空白进行调整  
     **使用消光系数3800 M ^-1 cm ^-1 
     ***使用光程校正0.92 cm 
     注意：许多分光光度计的输出均为mOD。每口井：

• r P. heparinus肝素酶III：0.05 µg
• 底物：1.0 mg / mL

在室温下，通过监测232 nm的吸光度，在5分钟的动力学分析中评估肝素硫酸盐（200μg）的肝素酶III消化率。R＆D Systems重组肝菌肝素酶III（产品目录号6145-GH）（橙色）比竞争类杆菌肝素酶III（绿色）具有更大的活性。

重构计算器

背景：肝素酶III

硫酸乙酰肝素是一种硫酸化的糖胺聚糖，具有重复的-4HexA1,4GlcNAcβ1-二糖单元。它通常附着在细胞膜和细胞外基质中发现的蛋白聚糖的蛋白质核心上，在那里它与各种蛋白质配体结合并调节广泛的生物活性（1、2）。硫酸乙酰肝素具有畴结构，其中硫酸化区域与较少或未硫酸化的区域间隔开（3、4）。肝素与硫酸乙酰肝素共享主链结构，但不包含非硫酸化区域。肝素酶是一类裂解酶，经消化后会从肝素和硫酸乙酰肝素中释放不饱和寡糖（5）。肝素酶I识别高度硫酸化的区域，对肝素更具特异性。肝素酶II消化肝素和硫酸乙酰肝素。

Entrez基因ID

8254931（P.肝素）

备用名

肝素酶III

产品列表如下：