瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠電泳試劑盒使用中問題

瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠電泳試劑盒使用過程中可能出現(xiàn)一些問題，比如：如何選擇預(yù)制膠濃度，選擇什么體系，Marker條帶電泳清晰但樣品電泳很差，回收低，掛孔和圖像不好等原因，惠誠(chéng)生物針對(duì)推出的該款預(yù)制膠進(jìn)行解答。

1、如何選擇預(yù)制膠濃度？

不同分子量對(duì)應(yīng)的預(yù)制膠濃度，實(shí)驗(yàn)情況很復(fù)雜，下表僅供參考：

2、能不能使用其他體系？

目前這款預(yù)制膠使用體系為TAE，不能在其他體系（如TBE/TPE）的電泳液中電泳；

3、Marker條帶電泳清晰，樣品電泳很差？

一般情況是樣本的問題，因?yàn)槟z只是一個(gè)平臺(tái)，不改變核酸的結(jié)構(gòu)和形態(tài)，具體解決方案如下：

A、調(diào)整電壓（一般降低）；B、減少上樣量或者稀釋；C、用新的制備樣品；D、調(diào)整PCR 的條件（如退火溫度）等等。

4、為什么回收低？

若回收低，需要調(diào)高熔膠溫度和延長(zhǎng)熔膠時(shí)間，具體原因如下：

A、膠是0.7cm 厚的標(biāo)準(zhǔn)膠，比用戶自配的膠在切膠的位置厚很多，因此在切膠的過程中切的膠要比自配的膠多；

B、膠孔比用戶原來自己的孔寬一點(diǎn)點(diǎn)，用戶在切膠的過程中也會(huì)比自配的膠切的多。

這樣的話，用戶使用他們?cè)瓉淼牧?xí)慣，在相同的時(shí)間膠沒有*熔掉，回收量就會(huì)少很多。

5、出現(xiàn)掛孔的原因？

用戶在電泳液外面點(diǎn)樣，樣品因?yàn)闆]有電泳液保護(hù)，會(huì)很快擴(kuò)散到膠里，有可能形成掛孔。

6、圖形不好怎么辦？

預(yù)制膠因?yàn)樵诘蜏貢r(shí)間長(zhǎng)，電泳時(shí)最好比客戶經(jīng)常使用的電壓低一些，調(diào)低20-40伏特左右，會(huì)得到比較好的圖形。

7、電泳是一個(gè)系統(tǒng)，任何原料都可能引起變化，任何改變也需要調(diào)整。根據(jù)實(shí)際需求，選擇*方案。

瓊脂糖預(yù)染預(yù)制膠電泳試劑盒使用中問題

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