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DNA恒温快速扩增试剂盒基础型使用说明书

时间:2024/10/30阅读:226
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产品参数


试剂组分(WLB8201KITWLB8201KIT48T/盒)
组成规格数量功能
A buffer
1.6ml1管主要为稳定蛋白/酶,性能的缓冲体系
B buffer0.15ml1管主要为镁离子等激活体系
正对照模板

0.1ml

1管主要是阳性质粒模版为检验试剂盒的有效性
正对照引物MIX0.06ml1管
主要是正对照模版的引物组合
冻干粉试剂8T/排,16T/包3包蛋白/酶体系的试剂工艺:冻干粉、冻干微球

注 Tips:

1. 高温变性不能有效去除蛋白,可能对产物分析造成影响;

2. 市场上部分扩增产物纯化试剂盒不适用,可能造成假阴性结果。

原理概述 :

本试剂盒基于一种常温恒温核酸快速扩增技术:在常温恒温下(一般为39oC~42oC),在辅助蛋白和单链结合蛋白的帮助下,重组酶和引物形成复合体;进行同源搜索并结合目的同源域,此时在该同源位置形成D-loop区并开始进行链交换;伴随着重组酶从复合体上解离,聚合酶也结合到引物的3’末端,开始链的延伸。

引物设计 :

建议使用长度在 30-35 bp 的引物,引物过短会影响扩增速度和检测灵敏度;引物设计避免形成二级结构而影响扩增;扩增子长度建议在 150-300 bp,通常不超过 500 bp。


image.png

由于试剂盒灵敏度非常高,在进行反应时请注意避免核酸污染,并设置空白对照;(图片为凝胶电泳法显示结果

产品特点及优势:

本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、反应时间短(仅需 30 min)等优点;反应组分为干粉状态,操作简便,易于保存。使用金属浴、水浴锅等即可进行反应操作;无需购买 PCR 仪等价格高昂的设备。

适用于实验室级别的DNA扩增以及其他检测用途的DNA扩增使用。


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