總多酚含量測試試劑盒(C001-96T 分光光度計(jì)法)

一.測定原理

福林酚試劑氧化多酚中-OH基團(tuán)并使其顯藍(lán)色，藍(lán)色的深淺與多酚的含量成正相關(guān)，沒食子酸一般在該方法中被默認(rèn)為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，采用沒食子酸溶液制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后將多酚含量表示為等價(jià)沒食子酸的量，即可求得待測樣品中總多酚含量。

二.試劑組成

試劑一：酚試劑25mL×1瓶

試劑二：顯色液 200mL ×1瓶

試劑三：1.0mg/mL沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 20mL×1瓶

三.儲存條件及有效期

試劑一、試劑二4℃保存，試劑三-20℃保存，可保存3個(gè)月。

四.試劑的配制

試劑一應(yīng)用液：將試劑用雙蒸水10×稀釋，制備成酚應(yīng)用液，每次測試需使用2.5mL，根據(jù)樣品數(shù)量計(jì)算好，用多少配制多少。

例：需要進(jìn)行38次測試，則可配制40次使用量：40×2.5mL=100mL，量取10mL試劑一加入90mL雙蒸水，充分混勻即可。

試劑三應(yīng)用液：

分別采用移液管移取1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL試劑三于100mL容量瓶中，采用雙蒸水定容至刻度，搖勻，制成濃度分別為10，20，30，40，50μg/mL的沒食子酸應(yīng)用液。

習(xí)慣用使用移液器的老師也可先在15mL離心管中分別加入9.9，9.8，9.7，9.6，9.5mL雙蒸水，再采用移液器分別移取100，200，300，400，500 μL 試劑三于相應(yīng)的離心管中，充分顛倒混勻，制成濃度分別為10，20，30，40，50μg/mL的沒食子酸應(yīng)用液。

五.操作步驟

充分混勻，室溫靜置5min使之充分反應(yīng)2。

  充分混勻，室溫靜置60min4，使用1cm光徑比色皿，765nm處采用分光光度計(jì)測定吸光度。