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超氧阴离子自由基清除能力测试试剂盒分光光度计法使用说明

时间:2020/5/18阅读:2134
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超氧阴离子自由基清除能力测试试剂盒

(A002-96T分光光度计法)

 

一.测定原理

该方法利用NADH-PMS-NBT为超氧阴离子(O2·-)生成系统,超氧阴离子清除剂能减少NBT的蓝色。通过检测560nm处吸光值可判断体系中还原物质的还原能力。

二.试剂组成

试剂一:液体40mL×1瓶;

试剂二:液体1mL一瓶;

试剂三:粉剂一支;

试剂四:粉剂一支;

试剂五:1mg/mL芦丁标准品,1mL。

三.储存条件及有效期

试剂盒-20℃可保存6个月。

四.试剂的配制

试剂一工作液:用时加双蒸水360mL,也就是10倍稀释,得到400mL试剂一工作液;

试剂二工作液:用赠送的棕色瓶配制。试剂二工作液由试剂二加上100mL试剂一工作液配得,现配现用,注意避光;

试剂三工作液:试剂三工作液由试剂三溶解于100mL试剂一工作液配得,现配现用;

试剂四工作液:粉剂一支。用50mL双蒸水溶解,摇匀后,取10mL,加入90mL试剂一,配成试剂四工作液,现配现用,用赠送的棕色瓶盛装。注意避光,配好的试剂请于2小时内用完。

试剂五:阳性对照,按需配制,-20℃保存。

五.操作步骤

 

空白孔1

测定孔

对照孔2

试剂一(mL)

1

 

1

试剂二工作液(mL)

1

1

1

试剂三工作液(mL)

1

1

 

样品(mL)

 

1

1

充分混匀

试剂四工作液(mL)

1

1

1


充分混匀,室温避光静置5min使之充分反应。560nm处,1cm光径比色杯,采用分光光度计测定吸光值。

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