A族鏈球菌（GAS）熒光探針PCR核酸檢測試劑盒采用 TaqMan 探針法實(shí)時熒光PCR技術(shù)，設(shè)計一對艱難梭菌特異性引物，結(jié)合一條特異性探針，用熒光PCR技術(shù)對艱難梭菌的核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測， 用于臨床上對可疑感染者的病原學(xué)診斷。在反應(yīng)體系中含基因組模板的情況下，反應(yīng)得以進(jìn)行并釋放熒光信號。利用熒光定量PCR儀對PCR過程中相應(yīng)通道的信號強(qiáng)度進(jìn)行實(shí)時監(jiān)測和輸出，實(shí)現(xiàn)檢測結(jié)果的定性、定量分析。

A族鏈球菌(GAS)熒光探針PCR核酸檢測試劑盒說明書

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：A族鏈球菌(GAS)核酸擴(kuò)增檢測試劑盒(PCR 熒光探針法)

Name ：Group A Streptococcus (GAS) Nucleic Acid Amplification Detection Kit (PCR Fluorescence Probe Method)

【包裝規(guī)格】48T/盒

【預(yù)期用途】

本試劑盒適用于檢測水樣糞便等樣本中的A族鏈球菌，用于A族鏈球菌感染的輔助診斷，其檢測結(jié)果僅供參考。

【檢驗(yàn)原理】

本試劑盒采用 TaqMan 探針法實(shí)時熒光 PCR 技術(shù)，設(shè)計一對A族鏈球菌特異性引物，結(jié)合一條特異性探針，用熒光PCR 技術(shù)對A族鏈球菌的核酸進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測， 用于臨床上對可疑感染者的病原學(xué)診斷。

【試劑組成】

2260小反芻獸疫抗體檢測試劑盒5*96T

2050布病抗體檢測試劑盒5*96T

1040藍(lán)耳病抗體檢測試劑盒5*96T

1070豬細(xì)小病毒抗體檢測試劑盒5*96T

1060豬瘟抗體檢測試劑盒5*96T

1020口蹄疫抗體檢測試劑盒5*96T

0130禽流感病毒抗體檢測試劑盒5*96T

0010禽滑液囊支原體抗體檢測試劑盒5*96T

2) DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA 提取試劑盒（離心柱提取法），請嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

4. PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）

4.1 將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi)；

4.2 設(shè)置好通道、樣品信息，反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL；

5. 結(jié)果分析判定

【注意事項】

0113RNA提取液（水煮法）2ml

0112DNA提取液（水煮法）2ml

0111病毒濃縮液10ml

0113基因組DNA提取試劑盒（磁珠法）50T

0112病毒總核酸提取試劑盒（磁珠法）50T

0111病毒RNA提取試劑盒（磁珠法）50T

0113基因組DNA提取試劑盒（離心柱法）50T

0112病毒總核酸提取試劑盒（離心柱法）50T

0111病毒RNA提取試劑盒（離心柱法）50T

5.1 結(jié)果分析條件設(shè)定

設(shè)置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機(jī)器自動分析的結(jié)果分析，當(dāng)曲線出現(xiàn)整體傾斜時，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié)Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動閾值線至高于陰性對照)，重新分析結(jié)果。

5.2 結(jié)果判斷

陽性：檢測通道 Ct 值≤35.0，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線。

可疑：檢測通道 Ct 值>35.0，且出現(xiàn)典型擴(kuò)增曲線的樣本建議重復(fù)試驗(yàn)，重復(fù)試驗(yàn)

結(jié)果出現(xiàn) Ct 值≤35.0 和典型擴(kuò)增曲線者為陽性，否則為陰性。

陰性：樣本檢測結(jié)果無 Ct 值且無明顯的擴(kuò)增曲線。

6. 檢測方法的局限性

1）樣本檢測結(jié)果與樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān)；

2）樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；

3）陽性對照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏，會導(dǎo)致假陽性結(jié)果；

4）病原體在流行過程中基因突變、重組，會導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

5）不同的提取方法存在提取效率差異，會導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

6）試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果；

7）本檢測結(jié)果僅供參考，如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。

7. 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品：無明顯擴(kuò)增曲線或無 Ct 值顯示；

陽性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長期，且 Ct 值≤32； 以上條件應(yīng)同時滿足，否則實(shí)驗(yàn)視為無效。

8. 產(chǎn)品性能指標(biāo)

陰陽性參考品符合率：5 份陽性參考品符合率為 100％；10 份陰性參考品符合率為100％。

低檢測限：1.0×10 3copies/mL。

精密度：批內(nèi)、批間精密度檢測 Ct 值的變異系數(shù)（CV）均小于等于 3%。

A族鏈球菌(GAS)熒光探針PCR核酸檢測試劑盒??相關(guān)產(chǎn)品：

0231轉(zhuǎn)基因大豆MON87769品系核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

0221轉(zhuǎn)基因大豆MON87708品系核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

0211轉(zhuǎn)基因大豆MON87705品系核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

0131轉(zhuǎn)基因植物FmV35S啟動子核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

0121轉(zhuǎn)基因植物NOS終止子核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

0111轉(zhuǎn)基因植物CamV35S啟動子核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T