當前位置:上海淳麥生物科技有限公司> 供求商機> Turbo感受態(tài)細胞
貨號: | CM-6022K |
供應商: | 上海淳麥 |
數(shù)量: | 1000只 |
英文名: | TurboChemically Competent Cell |
保質期: | 1年 |
保存條件: | 零下80度 |
規(guī)格: | 20*100ul |
Turbo
Turbo Chemically Competent Cell
Turbo感受態(tài)細胞基因型:
F' proA+B+ lacIqΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10) TetS endA1
thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5
Turbo感受態(tài)細胞簡要說明:
Turbo 菌株是生長的大腸桿菌菌株。-CMbio-
平板上 6.5 小時可見克隆,營養(yǎng)液中搖菌 4-6 小時可提取質粒,缺失核酸內切酶 (endA),提高了質粒 DNA 的產量和 質量;Turbo 菌株可嚴格控制 laclq 的表達,可以克隆毒性基因;fhuA2 突變賦予 Turbo 菌株對噬菌體 T1 的抗性;lacZ ΔM15 的存在使 Turbo 可用于藍、白斑篩選。-CMbio-
-CMbio-Turbo 感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19 質粒檢測轉化效率>5×108 cfu/μg DNA。
Turbo感受態(tài)細胞操作說明:
1. Turbo 感受態(tài)細胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5 分鐘后待菌塊融化,加入目的 DNA(質?;蜻B接產物) 并用手
EP 管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置 25 分鐘。-CMbio-
2. 42℃水浴熱激 45 秒,迅速放回冰上并靜置 2 分鐘,晃動會降低轉化效率。-CMbio-
3. 向離心管中加入 700 μl 不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (SOC 或 LB),混勻后 37℃,200 rpm 復蘇 60 分鐘。
4. 5000 rpm 離心一分鐘收菌,留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的 SOC 或 LB 培養(yǎng)基 上。-CMbio-
5. 將平板倒置放于 37℃培養(yǎng) 6.5 小時以上。-CMbio-
Turbo感受態(tài)細胞注意事項:
1. 感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化。插入冰中 8 分鐘內加入目標 DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降 低轉化效率。-CMbio-
2. 混入目的 DNA 時應輕柔操作。-CMbio-
3. 轉化高濃度的質粒或高效率的連接產物可相應減少終用于涂板的菌量。-CMbio-
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