Rosetta(DE3)感受態(tài)細胞基因型：

F^-ompT hsdS_B(r_B^-m_B^-)gal dcm(DE3) pRARE(argU，argW，ileX，glyT，leuW，proL)(Cam^R)
 

Rosetta(DE3)感受態(tài)細胞簡要說明:

Rosetta(DE3) 感受態(tài)細胞具有氯霉素抗性，補充大腸桿菌缺乏的6 種稀有密碼子(AUA，AGG， AGA， CUA，CCC， GGA) 對應的tRNA，提高外源基因，尤其是真核基因在原核系統(tǒng)中的表達水平，該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3區(qū)（DE3區(qū)含有T7噬菌體RNA聚合酶），同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達。
Rosetta(DE3) 感受態(tài)細胞由特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率高達10⁸cfu/μg。
 

Rosetta(DE3)感受態(tài)細胞操作說明:

1.  取100μl冰上融化的AngYuBio Rosetta(DE3)感受態(tài)細胞，加入目的質(zhì)粒并輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。

1.  向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基（2YT或LB），混勻后37℃，200rpm復蘇60分鐘。

4. 5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT 或LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。

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