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上海淳麦生物科技有限公司

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BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受态细胞

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更新时间:2024-12-23 21:49:27浏览次数:664次

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上海淳麦生物科技有限公司在感受态细胞的研发方面,实力雄厚,拥有了克隆、表达、酵母和农杆菌4大类,共计百余种感受态细胞。在电击感受态方面,拥有了大肠杆菌 电转化感受态细胞和农杆菌电击感受态种类,极大提高了客户在转基因以及文库构建方面的成功率。
货号:CM-6042G
供应商:上海淳麦
数量:1000只
英文名:JM110Chemically Competent Cell
保质期:1年
保存条件:零下80度
规格:20*100ul


 

BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受态细胞基因型:

FompT hsdS(rB mB) dcm+ Tetr galλ(DE3) endA Hte [argU proL Camr] [argU ileY leuW Strep/Specr]

BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受态细胞简要说明:

 BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株来源于Stratagene公司的BL21-Gold 菌株,缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶,从而减少对重组蛋白的降解,补充大肠杆菌缺乏的4种稀有密码子( AGA、AUA、CCC、CUA) 对应的tRNA (argU、ileY、proL、leuW),提高外源基因,尤其是富含AT-或 GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。
该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶),可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达,同时具有四环素,氯霉素,链霉素,壮观霉素抗性。
 BL21- Codon Plus(DE3)-RIPL 感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。

BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受态细胞操作说明:

  1.  取100μl冰上融化的 BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

  1.  向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

  1.  将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

 

BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受态细胞注意事项:

  1.   感受态细胞在冰上融化。
  2.  混入质粒时应轻柔操作。
  3.  转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
  4.  诱导时,IPTG浓度可?。?/span>0.1-2mM均可)。

5. 为获得需要量的蛋白,诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。

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